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生物技术综合实验课导言 一 课程目的与教学基本要求 二 教学内容及安排 三 教学的手段和方法 四 教学管理事项 任课教师 张添元(216) 邓庆丽(206) 谭红铭(205) 王 磊(丹5楼） 苏菁（丹5楼） 陆勇军（307） 教学安排－教学单元 课程的目的和基本要求 基础和专业课程知识的综合运用 学习和掌握一系列生物大分子的制备、分离、纯化的方法和技术 基因工程常规操作技术 了解并掌握各种常规生化仪器及发酵器材的使用和保养； 在科研素质，如分析和解决问题的能力方面获得培养和训练，为今后独立从事生物技术及相关学科领域的研究奠定基础。 教学内容－“一条龙”的综合性实验体系 上游的基因克隆技术：包括总RNA的提取、检测、逆转录PCR获得cDNA、质粒的酶切、连接技术、感受态细胞的制备、质粒的转化、质粒提取纯化、定量、重组质粒的鉴定 下游的生化技术：目的基因表达调控、目标产物的提取、纯化、鉴定、SDS电泳、柱层析、Western技术 特点：直观。GFP 实验安排的特点1－独立性和连贯性 每个实验单元本身既有相对的独立性，单元之间又有紧密的连贯性。即每个实验单元都有实验结果（有产物），上一实验单元的产物是下一单元的材料，联系紧密。每个实验单元的产物要保存好，留作下一单元用。 实验安排的特点2－实验具有可行性 所设立的实验方法和策略得当，只要操作正确，就会获得结果。 实验安排的特点3－实验材料可观性强 选用直观性强的材料： ――绿色荧光蛋白基因作为操作对象，其重组后表达的产物在紫外光下即可见其特有的黄绿色荧光，便可断定其是否重组成功及有无表达 －－基因重组子的蓝白斑筛选 －－亲和层析剂在层析过程中的颜色变化 教学方式－共同参与 教师讲授每单元内容，每个同学全程参与，动手操作，包括试剂的配制、仪器的安装、样品的处理 教学方式－自主开展 小组制，实行组长制，各组自主开展每个单元的设计和实验，组长负责协调组员与教师和实验员的联系（仪器及试剂的领取） 教学方式－开放实验 实验室全天开放。 课程作业－实验报告 每做完一项实验需写一份规范的实验报告。 每个同学各自写出有具体数据、符合逻辑推理的实验报告。 能对实验中碰到的问题进行分析并提出解决方法，或对实验方案提出修改。 实验报告要及时交给老师。 总结报告会 整个课程完成后，每组对整个实验做一个综合性总结，并推出1人以PowerPoint的形式在全班进行口头报告。老师或其他组的同学提出问题，请该组同学答辩。 卷面考试 主要进行实验原理、实验技巧、实验思路、实验分析和综合能力方面的考核 如何才能做好实验 充分预习 充分讨论 胸有成竹 充分准备 胆大心细 实验教学管理 由于这门课教学内容多，涉及面广，同学们独立操作时间长，有必要建立一系列的分项管理制度，如仪器损坏赔偿、实验室卫生、安全责任制等，更好地督促大家养成良好的学习、工作习惯，保证整个课程教学有序顺利地进行。 管理制度1－以小组为单位保管器具 由于实验是分组进行，每一组都有一套固定的玻璃仪器、层析柱、微量移液器、电泳仪等由各组使用和保管，特别是微量移液器由各组长签领，全部实验结束后再亲自交回老师注销。损坏或丢失要赔偿。 管理制度2－岗位责任制 由于独立实验时长，要求每位同学都 要有很强的责任心，认真、细致做好每一步实验。对仪器的使用、试剂的配制，不懂或不很明确时，要问老师或其他同学，千万不要想当然。组长有协调本组和其它组之间关系的责任。 管理制度3－卫生责任制 注意实验室 的卫生，实验桌面及公共区域要及时清理干净，值日安排表见门后。 管理制度4－安全工作 实验室的锁匙只能交给各班的班长负责，没有人做实验时要锁门，离开实验室前要关好水阀、拉下照明和空调电闸，注意防火、注意人身及钱财安全。 参考书： 1．现代分子生物学实验技术（第二版） 卢圣栋等编 高等教育出社出版 2．精编分子生物学实验指南 颜子颖等译 科学出版社出版 3．分子克隆实验指南（第二版） 金冬雁等译 科学出版社出版 多媒体设施 分子生物学实验操作录像 电子PCR实验软件 层析操作技术 教学安排 见下表 建议由每周4、5改为每周3、4、5、6连续4天，每班2天 分组安排 目前工作 按学号分组，3－4人一组 选组长 第3（4）周始，各组清点仪器设备、玻璃器皿 组长签领微量移液器 各实验单元开始 各班到实验室分配桌面 各班班长将各组长名字送给伍俭儿老师（211 未定班的同学尽快和班长联系，安排好后通知伍俭儿老师 谢谢 * * 黎丽娥(215) 陈云凤(415) 伍俭儿(211) 黄伟结(304) 笔试和总