分子生物学技术(中撒国药科大学).docVIP

分子生物学技术 克隆（clone） 定义：广义上是指利用生物技术由无性生殖产生与原个体有完全相同基因组的后代的过程。在生物学上，是指选择性地复制出一段DNA序列（分子克隆）、细胞（细胞克隆）或是个体（个体克隆）。克隆技术又称为“生物放大技术”。 限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）：识别并切割特异的双链DNA序列的一种内切核酸酶。它是可以将外来的DNA切断的酶，即能够限制异源DNA的侵入并使之失去活力，但对自己的DNA却无损害作用，这样可以保护细胞原有的遗传信息。由于这种切割作用是在DNA分子内部进行的，故名限制性内切酶(简称限制酶)。 命名方式：主要依据来源来定，一般是以微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组成，第四个字母表示菌株(品系)，最后的序号用罗马字符ⅠⅡⅢ表示第几个发现的。如HindII、HindIII，HpaI、HpaII，MboI、MboI等。 限制与修饰系统（Restriction-modification system，R-M system） 限制作用实际就是限制酶降解外源DNA ，维护宿主遗传稳定的保护机制。甲基化是常见的修饰作用，可使腺嘌呤A和胞嘧啶C甲基化而受到保护。通过甲基化作用达到识别自身遗传物质和外来遗传物质的目的。所以，能产生防御病毒侵染的限制酶的细菌，其自身的基因组中可能有该酶识别的序列，只是该识别序列或酶切位