大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞.PDFVIP

克 CAT#: 140576- 10 干冰运输、-80℃保存 必 隆 系 列 大肠杆菌 DH10 Bac 化学感受态细胞 E.coli DH10 Bac Chemical Competent Cell 使用手册 V1. 1 北京天恩泽基因科技有限公司 北京市海淀区上地信息路 26 号北京市留学人员海淀创业园中关村创业大厦 506 网址： ；电话：400-6765278 ；电邮：order@ 产品及特点 本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞 ，适用于昆虫杆状 病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株，用于产生重组 Bacmid 。使用 pUC19 质粒检测 ， 7 本产品转化效率可达 10 CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124 。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。 辅助质粒包含 tns ABCD 区域，该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶 位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒（pFastBac1 ，pFastBacDual 等） 含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂，Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒 多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后，发生重组后就可产生重组 Bacmid ，提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外，DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象，用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。 - - - 菌株基因型为：F mcrA Δ(mrr hsdRMS mcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 - endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 规格及成分 成分 编号 包装 本产品 140576 0.1 mL ×10 使用手册 1 份 运输及保存 干冰运输、-80℃保存 ，避免反复冻融，有效期半年 。 自备试剂 重组质粒、SOC 或 LB 培养基等 使用方法 1. 制备含 有如 下抗生 素的 LB 固 体平板 ： 50 μ g/mL Kanamycin ，7 μ g/mL gentamicin ，10 μg/mL tetracycline ，100 μg/mL X-gal ，40 μg/mL IPTG 。 2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50