短芒披碱草SRAP-PCR体系的建立和优化-中国农学通报.PDFVIP

中国农学通报 2014,30(30):259-264 Chinese Agricultural Science Bulletin 短芒披碱草SRAP-PCR体系的建立和优化 顾晓燕，郭智慧，张新全，刘 新，周朝杰，马 啸 （四川农业大学动物科技学院，四川雅安625014） 摘 要：通过单因子和正交设计两种试验方法，对短芒披碱草SRAP-PCR 体系进行优化，得到短芒披碱草 20 μL SRAP-PCR 最优反应体系为：Mg2+ 2.00 mmol/L 、引物0.40 μmol/L 、Taq DNA 聚合酶1.0 U 、dNTPs 250 μmol/L 、DNA 30 ng 和10×buffer 2 μL ；各因素水平变化对PCR 反应影响从大到小依次是：Mg2+ 、引 物、Taq 酶、dNTPs 和模板DNA 。运用该优化体系对6 份短芒披碱草材料进行验证，电泳结果显示扩增 条带多态性高，清晰无杂带。该优化体系的建立有助于将SRAP 标记技术用于短芒披碱草的遗传育种