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第三章 DNA突变技术 基因突变包括单个碱基或片断的替换，基因片断的插入与删除等。 根据其特点可将基因突变技术分两大类： 1.位点特异性突变 定点突变 2.随机突变 表型筛选 二、随机引物PCR(RPR)和重组装 定点突变的类型 寡核苷酸介导的基因突变指用含有突变碱基的寡聚核苷酸片断作为引物，在聚合酶的作用下启动DNA分子进行复制。 盒式突变是利用一段人工合成的含基因突变序列的寡核苷酸片段，取代野生型基因中的相应序列。 PCR介导的基因突变 PCR介导的基因突变 在基因5’和3’末端产生突变 重叠延伸PCR 大引物PCR法 重叠延伸PCR法小结 缺点：需要2对引物，进行3次PCR，并且需要对中间产物进行纯化。 优点：几乎没有特殊限制，而且成功率高，因此运用非常广泛。 同时利用重叠延伸PCR技术可以对基因中心区段进行取代、插入、缺失的突变。 应用产品 一步反向PCR法 Stratagen公司的QuikChange?系列试剂盒 SBS Genetech公司的Muta-direct? Site Directed Mutagenesis Kit Stratagen公司的QuikChange? Multi Site-Directed Mutagenesis Kit TaKaRa公司的Multipoints Mutagene