猪脑乙酰胆碱酯酶的分离纯化和性质研究.PDFVIP

※生物工程 食品科学 2015, Vol.36, No.03 137 猪脑乙酰胆碱酯酶的分离纯化和性质研究 王 洁，李 星，王红扬，唐云明* （西南大学生命科学学院，重庆市甘薯工程研究中心，三峡库区生态环境教育部重点实验室，重庆 400715 ） 摘  要：通过离心、硫酸铵分级沉淀、DEAE-Sepharose和Superdex-200层析等步骤，从猪脑中获得电泳纯乙酰胆 碱酯酶，该酶比活力和纯化倍数分别为2.05 U/mg和26.97 ，酶活回收率为11.95% ；该酶分子质量为257.30 kD ， 亚基为66.94 kD ；以碘化硫代乙酰胆碱为底物时，酶的最适反应温度为37 ℃，最适pH值为7.4 ，且在40 ℃以下， pH 6.0 ～8.0有较好的稳定性；最适底物浓度为4.0 mmol/L ，Km 为0.94 mmol/L 。Ba2+和Zn2+对该酶有强烈的抑制作 用，而低浓度Mg2+对该酶有激活作用。 关键词：乙酰胆碱酯酶；猪脑；分离纯化；性质