脓汁和粪便标本中病原菌检测-2.pptVIP

power socket →test tube rack →Alcohol burner →kidney basin test tube rack → inoculating needle , inoculating loop ； oil base pen , lighter. 实验器材 整齐有序 * * * 器材准备 脓汁标本1支，粪便标本1支；碘酒棉球1瓶，酒精棉球 1瓶，眼科镊子2把；伊红美兰平板2个，营养琼脂平板5个。 自然界中的微生物 已经发现的微生物超过13万5千种，被认为非常危险的有600种，在人间传染的病原微生物380种。它们存在于地球的各个角落，从寒冷的极地到炎热的赤道，从4.2千米地层深处到85千米高空（芽孢）,均有它们的踪迹 。 空气、水、土壤、人体的体表以及与外界相通的腔道，均有不同种类和数量的微生物存在。 皮肤菌群示意图 ↑ ※存在于人类肠道的细菌超过800种，数量可达100万亿（1014），菌体重量1～1.5公斤（next slide ） MICROBIAL LOCATOR MAP OF THE BODY 人体谁当家作主？肠道菌群当家人做主？! 医学微生物学实验综合性实验三  Comprehensive Experiment NO:3 Environmental flora and Normal Bacterial flora on Skin 空气的细菌学检查P38 手指皮肤的细菌学检查P41 空气的细菌学检查 空气是人类赖以生存的环境之一，也是重要的疾病传播媒介。空气中的病原菌主要来自病人的排泄物和分泌物。这些污物，因风吹，以及人类日常活动，以气溶胶的形式悬浮于空中，使空气受到污染。 环境：不利于微生物生长。 种类：主要是病毒、真菌和细菌。在医院，公共场所致病菌的数量比较多。 作用：可迅速全球传播。 危害：引起培养基、生物制品的污染，病原菌引起呼吸道传染病。 按照无菌操作的方法打开、盖上平皿盖。 实验方法(自然沉降法):根据空气中细菌气溶胶粒子，在地心引力的作用下，以垂直的自然方式沉降到培养基表面，培养以后，计数菌落形成单位（ colony forming unit ，CFU），可了解空气的污染情况。 实验步骤：每组1个琼脂平板，做标记。选择采样地点：实验室、卫生间或任选地点。严格无菌操作，将平板盖打开，移动放置在平皿边缘；平板暴露于空气中15分钟，反向盖上。37℃温箱培养24小时，观察结果。 ※ CFU/m3 ＝ 50000N÷AT≈86N(直径7cm平板）。 N：平板上的菌落数。 A：平板面积(平方厘米)。 T：采样时间(分钟)。 空气的细菌学检查 暴露法（Exposure Method) 组号 采样地点 采样时间(min) 菌落形成单位(CFU) 1 实验室 15 2 卫生间 15 3 门诊大厅 15 4 呼吸科走廊 15 5 呼吸科病房 15 6 呼吸科ICU 15 7 外科走廊 15 8 外科病房 15 9 外科ICU 15 10 外科治疗室 15 手指皮肤的细菌学检查 在日常生活中，手的接触范围广，使用频率高，受到污染的机会也最多。一只外观比较“干净 ”的手，可携带10万个细菌、200多种病毒。经手传播的疾病，包括肠道传染病、部分呼吸道传染病、皮肤传染病，以及一切可经手传播的疾病。 常住菌：存在于皮肤表面、毛囊和皮脂腺。种类和数量比较恒定。附着在皮肤上比较牢固，用一般洗手方法，常不易去除。 暂住菌：存在于皮肤表面经常暴露的部位。暂住菌是外来的非正常菌群，种类和数量不定。引起人类致病的通常是暂住菌。 实验设计：假设同一只手中间三个手指皮肤环境密切相关、细菌数量相当，分别作洗手、消毒前后细菌学检查。 常规的洗手方法（甲和丙操作） 将手充分浸湿，涂抹肥皂或洗涤液。 反复搓揉双手，搓揉时间不少于 30秒。 用流水冲洗干净，整个洗手过程不少于1分钟。 ※能有效地去除大多数暂住菌。 医学微生物学教学实验室标准洗手方法（乙丁操作） 用流动的水冲洗，将手充分浸湿，涂抹肥皂、洗涤液。 分别搓擦10～15次。 保持双手低于肘部，流水冲洗一分钟以上。 1.掌心对掌心搓擦 2.手指交错掌心对手背搓擦 3.手指交错掌心对掌心搓擦 4.两手互握互搓指背 5.拇指在掌中转动搓擦 6.指尖在掌心中搓擦 手指皮肤的细菌学检查 甲和乙、丙和丁共用1个平板 上:甲、丙→常规洗手 下:乙、丁→标准洗手 第1格为洗手前， 第2格为洗手后， 第3格为消毒后， 第4格空白对照。 丙 丁 1 2 3 4 丙 丁 1 2 3 4 平板面朝