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- | 2004-05-31 颁布
- | 2004-10-01 实施
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ICS 65.080
B 10 荡黔
中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准
GB/T19524.2-2004
肥料中蛔虫卵死亡率的测定
Determinationofmortalityofascaridegginfertilizers
2004-05-31发布 2004-10-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 发 布
中 国 国家 标 准 化 管 理 委 员 会
GB/T19524.2-2004
oli 舀
本标准由中华人民共和国农业部种植业管理司提出。
本标准由农业部微生物肥料质量监督检验测试中心负责起草。
本标准主要起草人:姜听、李俊、沈德龙、曹凤明、李力。
GB/T19524.2-2004
肥料中蛔虫卵死亡率的测定
1 范围
本标准规定了肥料中蛔虫卵死亡率的测定方法。
2 测定方法原理
将碱性溶液与肥料样品充分混合,分离蛔虫卵,然后用密度较蛔虫卵密度大的溶液为漂浮液,使蛔
虫卵漂浮在溶液的表面,从而收集检验。
3 仪器设备
往复式振荡器;天平;离心机;金属丝圈(约句.0cm);高尔特曼氏漏斗;微孔火棉胶滤膜(035mm,
孔径。.65K。一。.80tCm);抽滤瓶;真空泵;显微镜;恒温培养箱及其他试验室常用仪器、物品等。
4 试剂
本标准所用试剂,在没有注明其他要求时,均指分析纯。
a) 50.0g/L氢氧化钠溶液;
b) 饱和硝酸钠溶液(密度 1.38-1.40);
c) 500mL/L甘油溶液;
d) 20mL-30mL/L甲醛溶液或甲醛生理盐水。
5 检验步骤
5 1 样 品处理
称取5.0g-10.0g样品(颗粒较大的样品应先进行研磨),放于容量为50mL离心管中,注人氢氧
化钠溶液25mL^30mL,另加玻璃珠约 10粒,用橡皮塞塞紧管口,放置在振荡器上,静置30min后,以
200r/min-300r/min频率振荡10min-15min。振荡完毕,取下离心管上的橡皮塞,用玻璃棒将离心
管中的样品充分搅匀,再次用橡皮塞塞紧管口,静置 15min-30min后,振荡10min-15min,
5.2 离心沉淀
从振荡器上取下离心管,拔掉橡皮塞,用滴管吸取蒸馏水,将附着于橡皮塞上和管口内壁的样品冲
人管中,以2000r/min-2500r/min速度离心3min-5min后,弃去上清液。然后加适量蒸馏水,并
用玻璃棒将沉淀物搅起,按上述方法重复洗涤三次。
5.3 离心漂浮
往离心管中加人少量饱和硝酸钠溶液,用玻璃棒将沉淀物搅成糊状后,再徐徐添加饱和硝酸钠溶
液,随加随搅,直加到离管 口约 1cm为止,用饱和硝酸钠溶液冲洗玻璃棒,洗液并人离心管中,以
2000r/min-2500r/min速度离心3min-5min,
用金属丝圈不断将离心管表层液膜移于盛有半杯蒸馏水的烧杯中,约30次后,适当增加一些饱和
硝酸钠溶液于离心管中,再次搅拌、离心及移置液膜,如此反复操作3次~4次,直到液膜涂片在低倍显
微镜下观察不到蛔虫卵为止。
5.4 抽滤镜检
将烧杯中混合悬液,通过覆以微孔火棉胶滤膜的高尔特曼氏漏斗抽滤。若混合悬液的浑浊度大,可
更换滤膜。
GB/T19524.2-2004
抽滤完毕,用弯头镊子将滤膜从漏斗的滤台上小心取下,置于载玻片上,滴加二、三滴甘油溶液,于
低倍显微镜下对整张滤膜进行观察和蛔虫卵计数。当观察有蛔虫卵时,将含有蛔虫卵的滤膜进行培养。
5.5 培养
在培养皿的底部平铺一层厚约 1cm的脱脂棉,脱脂棉上铺一张直径与培养皿相适的普通滤纸。为
防止霉菌和原生动物的繁殖,可加人甲醛溶液或甲醛生理盐水,以浸透滤纸和脱脂棉为宜。
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