pEGFP-N1-TGF-β1重组质粒对结肠癌细胞增殖,细胞周期及侵袭性的影响.doc

PAGE PAGE 8 pEGFP-N1-TGF-β1重组质粒对结肠癌细胞增殖﹑细胞周期及侵袭性的影响问题1： 问题1： 【作者介绍: 】 于 宏 (1982-),女,（ ）省/市人，硕士研究生,主要研究方向: 从事消化系统肿瘤方面的研究.。 【通信讯作者】: 姜 政 (1965-),男,主任医师,教授,硕士研究生导师. E-mail: HYPERLINK mailto:jiangz1753@163.com jiangz1753@163.com. 于 宏，姜 政*，王丕龙（400016 重庆 重庆医科大学.附属第一医院消化科） 【摘要】 目的 探讨 在体外探讨转化生长因子-β1（TGF-β1）的真核表达载体对结肠癌细胞增殖﹑细胞周期及侵袭性的影响，为阐明TGF-β1在结肠癌发生、发展中的作用以及建立相应的基因沉寂治疗途径奠定基础。方法 将构建的重组质粒pEGFP-N1-TGF-β1转染入结肠癌细胞系SW480中，应用荧光显微镜、RT-PCR和Western blot检测TGF-β1基因的表达情况。通过；MTT法检测细胞生长情况；流式细胞仪分析SW480细胞周期变化；Transwell侵袭试验验证TGF-β1对细胞侵袭能力的影响。结果 转染重组质粒pEGFP-N1-TGF-β1后，通过荧光显微镜观察到绿色荧光的表达，RT-PCR和 Western blot检测到TGF-β1基因的转录及蛋白表达增强；细胞周期分析显示TGF-β1使细胞停留在G1期，S期细胞明显减少，同时发现SW480细胞的增殖受到明显抑制，达到60%；Transwell侵袭试验显示：SW480细胞的侵袭能力明显增强。结论 TGF-β1能抑制SW480细胞的增殖，使细胞停留在G1期，但同时能增强其侵袭能力。其作用可能与免疫抑制/逃逸、增加血管生成以及增加肿瘤细胞与细胞外基质的相互作用有关。 【关键词】转化生长因子-β1；SW480细胞；结肠癌；侵袭 【中图分类号】　　　　　 【文献标识码】　 The effect of transforming growth factor-β1 on cell cycle, proliferation and invasive capacity of human colon cancer cells YU hong, Jiang zheng et al. (Department of Gastroenterology, The First Affiliated Hospital, Chongqing 【Abstract】Objective: In vitro investigate the effect of transforming growth factor-β1 (TGF-β1) on cell cycle, cell proliferation, and invasive capacity of human colon cancer cells of the line SW480, in order to lay the foundation for elucidating effects and its machaniam of TGF-β1 in colon carcinogenesis and development, as well as constructing the correspondence genetherapy with RNA interference. Methods: The recombinant expressing plasmids (pEGFP-N1-TGF-β1) was constructed and transfected into human colon cancer cells of the line SW480 cells by Lipofeetamine 2000. protein in SW480 cells were detected by fluorescent microscopy, RT-PCR and Westen blot respectively. The cell proliferation of SW480 cells was tested by MTT assay, the cell cycle was analyzed by flow cytometry, and the invasion ability of SW480 cells were investigated by transwell-matrigel invasion chambers. Results: After transfected into SW48