吞噬角叉菜胶.PPT

疗效判定 对照组平均肿胀度— 给药组平均肿胀度 抑制率= ——————————————————×100% 对照组平均肿胀度 肿胀度，对照组与给药组经统计学处理 （一般为t检验） 有显著性差异p＜0.05或p＜0.01 炎症病理模型： 急性炎症模型 角叉菜胶或白蛋白致大鼠足跖肿胀法 二甲苯致小鼠鼠耳肿胀度法 大白鼠胸膜炎法 白细胞趋化性体内实验法 慢性炎症模型 大鼠棉球植入法 （即肉芽肿模型） 大鼠巴豆油免疫法 免疫性炎症模型： 大鼠佐剂性关节炎 豚鼠免疫性胸膜炎 要确定一个药物有无抗炎作用，宜采用多种炎症模型，即急性炎症模型2~3种，肉芽肿模型，免疫性炎症模型一种，综合结果，评定疗效。 常用的抗炎实验方法 1.大鼠足跖肿胀法 致炎剂: 短效致炎剂：白蛋白、5-HT、组织胺等30min炎症肿胀达高峰，消失亦快。 中效致炎剂：角叉菜胶、琼脂、酵母60min炎症肿胀达高峰。 这两类致炎剂以角叉菜胶效果最好，优点为肿胀模型可靠，差异性小，有高度的重现性。 实验原理： 第一阶段：肥大细胞吸收角叉菜胶，脱颗粒释放PGE，局部充血水肿，持续60min。 第二阶段：受损的内皮细胞释放IL-1，使WBC移入，吞噬角叉菜胶，释放磷脂酶A2和PGs，导致水肿渗出。 方法要点： 取雄性大鼠，设立给药组、阴性及阳性对照组，致炎前30 ~ 60min 给药（ ig~30min ， ip~60min），在足跖腱膜下用1%角叉菜胶0.05ml致炎，测定给药前、给药后5min、30min、1h、2h、4h、6h足爪的周长或容积。 观察指标： 以致炎前后周长或容积的差值为肿胀度，周长可由专门的熟练人员用软皮尺测定，或测定容积则由专门的容积测定仪测定。 统计方法： 计算给药组与对照组肿胀度均值与标准差，各用药组的抑制率。并进行组间t检验，比较给药组与对照组的显著性差异。 评价： ①本法未应用最广的炎性水肿模型，具有差异性小，敏感性和重现性高等优点但特异性低，非抗炎药也可能有效。 ②大鼠易得，勿需复杂仪器，简便易行。 2.鼠耳肿胀法 将小鼠随机分成各组，用二甲苯涂于左耳上，可发生炎症反应，涂二甲苯后30min腹腔注射或灌胃给药，4h后将小鼠处死，剪下两耳，打孔器打下圆孔片，称重。 每鼠左耳片重减去右耳片重即为肿胀度。 评价：新抗炎药常规筛选方法，初筛。见效快，用药量少，成功率较高，成本较低。 3.大鼠棉球植入法 （1）原理： 棉球植入大鼠体内引起结缔组织增生，这种增生与慢性炎症后期病理改变相似，用于评定抗炎药物抗增殖作用。 基本方法： 大鼠乙醚浅麻后下腹消炎，腹股沟皮下植入灭菌棉球（事先加入氨苄青霉素，防止大鼠局部感染），手术后连续给药7天，第8天脱颈椎，取出棉球称重，减去棉球原重，即为肉芽肿重量*，然后计算抑制率并进行统计分析。 *为消除体重因素影响，肉芽肿重量以mg（肉芽肿）/100g（体重）表示。 肉芽肿概念： 常见于慢性的增生性炎症，由巨噬细胞及其演化细胞浸润增生形成的境界清楚的结节状病灶。 知识链接 肉芽肿 肉芽肿分类： 异物性肉芽肿：外科缝线、木刺等异物引起肉芽肿。病变以异物为中心，周围有多量巨噬细胞、异物巨细胞和成纤维细胞包绕，形成结节状病灶。 感染性肉芽肿：由病原微生物感染引起的肉芽肿，其增生的细胞成分在形态学上常具有一定的特殊性，对诊断有一定的意义。如结核性肉芽肿。 结核性肉芽肿 注意事项： ①棉球重量应尽量一致，50±1mg。 ②棉球形状相近，搓成圆球状。 ③注意无菌操作，防止感染。 ④植入部位尽量一致。 评价： ①本法是评定药物抗增殖作用的最常用的方法。 ②对氢化可的松等甾体抗炎药较为敏感，可做为阳性对照药。 ③增生组织易向棉球内浸润，较难剥离，影响精确度。 4.大鼠佐剂性关节炎法 免疫反应性炎症模型 变态反应也是免疫反应，不过是以组织损伤功能紊乱为表现的免疫反应，临床上类风湿关节炎即是一种变态反应性疾病（或称超敏反应性疾病），它属于免疫复合物型变态反应，即Ⅲ型变态反应。 类风湿关节炎发病机理： 抗原是变态的免疫球蛋白IgG（变性的抗体）与抗IgG抗体（