核酸酶P1催化水解热变性DNA的研究-生物加工过程.PDF

第! 卷第 期 生 物 加 工 过 程 7/8 ##$ ##$ 年$ 月 %’()*) +,-.(/0 ,1 2’,3.,4)** 5(6’()).’(6 ·999 $! · 核酸酶:! 催化水解热变性;= 的研究 吴永宏，肖明芳，吕9 浩，应汉杰! （南京工业大学 制药与生命科学学院，南京###? ） 摘9 要：用桔青霉菌株@7# （!#$%$$’( %$)*$#’( @7# ）发酵制得的核酸酶 : 催化水解热变性;= ，在研究温度、 3A、酶加入量等因素对水解结果的影响的实验基础上，通过正交实验获得最佳的工艺条件：温度$B C ， 底物浓度、 3A DE $ ，;= 质量浓度FE # 6G H ，酶加入量F I ，脱氧核苷酸的得率?I 。在此基础上推导出其催化米氏常数+( J $E BB K # L 6G H 。 关键词：核酸酶:；水解；热变性;= ；优化；米氏常数 中图分类号： MBF N ?9 9 9 9 文献标识码：=9 9 9 9 文章编号：DO L !DOB（##$ ）# L ##$! L #$ #$%’( )* ’*+,-.#/ 0,%1)2,(( )3 #0’ 0’.#4%’*.#$1’% 567 8, *$/2’.(’ 9 PQ R,(6S,(6 ，T@=U 7’(6S1/(6 ，HQ A/, ，R@V A/(SW’) （%,00)6) ,1 H’1) X4’)(4) /(Y :/.Z/48 ，/(W’(6 Q(’[).*’\8 ,1 ])4(,0,68 ，/(W’(6 ###? ，%’(/ ） 78(#1./# ：-40)/*) : ,^\/’()Y \.,-6 1).Z)(\/\’,( ^8 !#$%$$’( %$)*$#’( _/* -*)Y 1,. \) )(‘8Z/\’4 8Y.,08*’* ,1 \) )/\SY)(/\-.)Y ;= ，^/*)Y ,( \) ’([)*\’6/\’,( ,1 \) Z/’( )11)4\ 1/4\,.* ，*-4 /* \)ZS 3)./\-.) ，3A ，\) ’(’\’/0 *-^*\./\) 4,(4)(\./\’,( /(Y \) Z/** 4,(4)(\./\’,( ,1 )(‘8Z) ，\) ,3\’Z-Z 8Y.,S 08\’4 4,(Y’\’,( _/* ,^\/’()Y \.,-6 ,.\,6,(/0 \)*\ ，\/\ _/* \)Z3)./\-.) $B C ，3A DE $ ，\) Z/** 4,(S 4)(\./\’,( ,1 ;= FE # 6G H ，\) 4,(4)(\./\’,( ,1 )(‘8Z) F I N ]) 8’)0Y ./\) ,1 ;= _/* ?I N 2/*)Y ,( \) 4/04-0/\’,( ,1 )a3).’Z)(\/0 Y/\) ，7’4/)0’* 4,(*\/(\ _/* ,^\/’()Y /* +( J $ N BB K # L 6G HN :’, ;)1%( ：(-40)/*) :；8Y.,08*’* ；)/\SY)(/\-.)Y ;= ；,3\’Z’‘/\’,( ；7’4/)0’* 4,(*\/(\ 9 9 核酸酶 :（5%!E E !#E ）是一种含锌金属酶， 而且对热变性;= 的水解或脱氧核苷酸的应用基 由桔青霉（!#$%$$’( %$)*$#’( ）发酵制得，可以水解 础研究也鲜见报道。本文对核酸酶: 催化水解热 b= 和热变性;= 的磷酸二酯键而得到$ cS核苷酸 变性;= 的反应条件做了深入研究，为工业开发应 ［S! ］ 和$ cS脱氧核苷酸 。脱氧尿嘧啶核苷酸和脱氧胞 用提供了可靠的参考数据。