针刺对脑出血模型大鼠时效性研究.pdfVIP

针刺对脑出血模型大鼠的时效性研究1 1 2 刘学文 ，李平 1 天津中医学院研究生部，天津（3300193 ） 2 天津市南开医院，天津（300100 ） E-mail ：shangshiqiangtcm@163.com 摘 要：目的：在脑出血模型大鼠血肿形成后不同时间（3h、9h、24h 、48h ）开始介入针刺， 通过观察针刺对脑血肿周围组织病理形态结构及炎症反应、细胞凋亡的影响，来研究不同时 机介入针刺对脑出血病理发展的干预作用，探讨针刺时机与脑出血继发性损伤的关系。方法： 采用自体血注入尾状核模型大鼠，按体重随机分为正常组、模型组和四个针刺组。针刺组分 别于造模成功后3h、9h、24h 、48h 开始针刺，每日针刺2 次，连续针刺3 天，针刺组与模 型组均在造模成功后五天处死，断头取脑，观察各项指标。结果：针刺能改善脑血肿周围组 织病理改变，减轻脑水肿，改善神经功能缺损情况，降低炎症反应相关因子TNF-α、ICAM-1 及促凋亡因子Bax 的表达，增高抑凋亡因子Bcl-2 及HSP70 的表达，减少细胞凋亡的发生， 这些作用均与介入时机正性相关。结论：针刺能减轻脑出血大鼠脑组织炎症反应，抑制细胞 凋亡，并且介入时机越早，效果越好，可以认为脑出血治疗也有时间窗，更早打破脑血肿周 围半影区的恶性病理循环，对脑组织的功能恢复更有益处。 关键词：脑出血；细胞凋亡；时间窗；半暗带；针刺 中图分类号：R246.6 1. 引言 脑出血是急性脑血管疾病中的危重类型，发病率、死亡率及致残率均较高，严重危害人 类健康及生活质量，给社会带来沉重负担。中医包括针灸疗法在出血性中风的治疗中得到广 泛应用，已成为整个治疗体系中尤其是康复过程中不可缺少的一部分。但是，对出血性中风 急性期能否采用针刺多年来一直存在争议。本项研究主要针对针刺治疗出血性中风的时效关 系进行研究，针对脑出血目前比较公认的关键病理环节如炎症反应和细胞凋亡，深入研究针 刺对这些关键病理环节的作用，揭示针刺治疗作用及治疗作用与针刺介入时机的相关性，为 临床提供有价值的、可靠的理论依据。 2. 系统介绍 2.1 材料与方法 2.1.1 实验动物与分组 健康Wistar 大鼠(北京医科大学实验动物中心提供),体重250 －320g，雄性。按体重随机 分为正常组、模型组、针刺组，针刺组又按针刺介入时间分为 3h 针刺组、9h 针刺组、24h 针刺组、48h 针刺组，每组10 只。 2.1.2 实验仪器及主要试剂 脑立体定向仪（日本SR-6N ）；微量注射器（上海激光医学仪器厂）；涡轮牙钻机（北 京自动化仪表三厂）；电子天平（日本ANDHR-120,精确度为）；恒温干燥箱（北京市朝阳 区来广营医疗器械厂）；CMIS 型细胞医学图像分析系统（重庆天海）；石蜡切片机（德国 LEICA RM 2135 ）；OLYMPUS 光学显微镜（日本）；天平（常熟市衡器厂HR—120 ）； 1本课题得到国家教育部博士学科点专项科研基金项目(20040063010)的资助。 - 1 - 手术器械。 磷酸盐缓冲试剂(0.1MPBS 液,PH:7.2-7.4)：用氯化钠9 克，12 水磷酸氢二钠6 克，2 水 磷酸二氢钠0.4 克，加蒸馏水至1000m1。调整PH 值到7.2-7.4 。 枸橼酸盐缓冲液(0.01M)：枸橼酸三钠3 克，枸橼酸0.4 克，加蒸馏水至1000m1。 防脱片剂：APES 购自北京中山生物技术有限公司。 甲苯、丙酮、无水乙醇、30%过氧乙酸，均为上海试剂一厂产品。 苏木素、伊红为北京试剂三厂产品。 即用型SABC 免疫组织化学染色试剂盒、DAB 显色试剂盒、一抗均为武汉博士德生物 工程有限公司产品。 2.1.3 脑出血模型的建立