专题基因工程的基本操木作程序.pptVIP

学车问答 学车问题回答 [例2]　右图为某种质粒表达载体简图， 小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、 BamHⅠ的酶切位点，ampr为青霉素抗性基 因，tetr为四环素抗性基因，P为启动子，T为 终止子，ori为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括 EcoRⅠ、BamHⅠ在内的多种酶的酶切位点。 据图回答： (1)将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，酶切产物用DNA连接酶进行连接后，其中由两个DNA片段之间连接形成的产物有________________、________________、__________________三种。 (2)用上述3种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化实验。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有________________；若接种到含青霉素的培养基中，能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物有____________。 (3)目的基因表达时，RNA聚合酶识别和结合的位点是________，其合成的产物是________。 (4)在上述实验中，为了防止目的基因和质粒在酶切后产生的末端发生任意连接，酶切时应选用的酶是________________。 [思路点拨]