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- 2019-01-12 发布于福建
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第2章6蛋秋白质分离纯化
2.6 蛋白质的分离、纯化;研究蛋白质的结构、性质和功能,首先需要得到纯的蛋白质样品。
(1)蛋白质来源:微生物细胞、动物细胞和植物细胞;
(2)随时测定蛋白质活性并检测蛋白质含量。
(3)分离和纯化过程都必须在温和的条件下进行。;(1)生物组织的机械破碎。常用的方法有研磨法、超声波法、冻融法和酶解法等。
(2)根据蛋白质的特性,选择不同的溶剂进行抽提。
水溶性蛋白用中性缓冲溶液抽提,酸性蛋白用稀碱性溶液抽提,脂溶性蛋白用表面活性剂抽提等。
(3)粗提: 离心除去固体杂质后,可通过沉淀法、超滤法、萃取法等处理,得到蛋白质粗制品。
(4)精制:可用层析法、电泳法等进行精制。
(5)成品加工:测定蛋白质的性质并干燥成成品。
;四、蛋白质的纯化方法;根据蛋白质的亲水胶体性质,当其环境发生改变时,蛋白质会发生沉淀作用(Precipitation)。
因为蛋白质分子量大??不同、表面所代电荷不同、表面的亲水和疏水区域不同,所以可以通过可逆沉淀法将蛋白质分离出来。
沉淀法具有部分纯化、浓缩特点。; 蛋白质的纯化方法; 蛋白质的纯化方法; 蛋白质的纯化方法; 蛋白质的纯化方法; 蛋白质的纯化方法; 蛋白质的纯化方法; 蛋白质的纯化方法; 蛋白质的纯化方法;分子筛层析(gel-filtration chromatography);这是一种高效分离纯化蛋白的方法。其
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