疣吻沙蚕成熟精子的微细结构1.PDF

疣吻沙蚕成熟精子的微细结构1 李海云，罗开杰，温山鸿，吴玉刚 华南农业大学动物科学学院，广州（510642 ） E-mail ：hyli@ 摘 要：本文采用扫描和透射击电镜技术，研究了疣吻沙蚕（Tylorrhynchus heterochaetus ） 成熟精子的微细结构。结果表明疣吻沙蚕的成熟精子为典型的鞭毛型，头部外观呈半干的 枣状，长约2-3µm ，宽约1.5-2µm，尾部长于30µm；精子头部内部主要为电子致密的粗广 口瓶状细胞核、占据精子头部大部分区域，核前方为伞帽状顶体，顶体正前方为电子密度 低于顶体的小盘状区域，顶体与核之间为电子密度较低的顶体下区，核基部为四个球状的 线粒体，由线粒体之间的远端中心粒产生典型的“9+2”轴丝为中轴的尾部结构。 关键词：疣吻沙蚕，精子，微细结构 中图分类号：Q 文献标识码：A 疣吻沙蚕(俗称禾虫，Tylorrhynchus heterochaetus) ，在系统分类上属于无脊椎动物中的 环节动物门(Annelida)，多毛纲(Polychaeta)，游走目(Errantia)，沙蚕科(Nereidae), 疣吻沙蚕 属(Tylorrhynchus)，是一广泛分布于暖温带和亚热带沿海的种，在印度尼西亚、越南、日 本、日本海、俄罗斯沿岸的大彼得湾及我国南京、上海、福建和广东等都有分布[1] 。疣吻 沙蚕食药兼用，具有补脾益胃、补血养血等食疗功效，清人赵其光《本草求原》二十七卷 上载：“禾虫，甘温，无毒。暖胃，补气，少加醋皮，发疥疮”[2] 。在南方及港澳地区，禾 虫长久以来一直被视作一种富含蛋白质、营养价值较高的地方特色美食，倍受食客青睐， 在广东东莞、番禺等地，更被誉为水产珍品。疣吻沙蚕是南方海湾底栖生物中重要的经济 物种之一[3-4]，同沙蚕科中的许多其他种类一样, 具有良好的经济利用前景。 近年来由于酷捕滥采、施用化肥、工业污染等的影响使疣吻沙蚕生长区的自然条件恶 化，产量逐年减少。人工围塘养殖，却没有足够的自然种苗放养，严重制约了此类沙蚕的 开发利用。我们首次研究疣吻沙蚕成熟精子的微细结构，以期为疣吻沙蚕生殖生物学及人 工繁殖奠定形态学基础。 1. 材料与方法 1.1 扫描电镜样品的制备 取雄性成熟疣吻沙蚕节片，在0.1 mol/L 磷酸缓冲液中快速漂洗3 次，然后迅速放入4 ℃ 的2.5 ％戊二醛前固定4 小时以上，再经4 ℃的1％四氧化锇后固定1 小时，2.5 ％戊二醛和 1％四氧化锇都由pH7.4 的0.2mol/L 磷酸缓冲液配制，双固定后经0.1mol/L 磷酸缓冲液漂 洗3 次，再经梯度酒精脱水，HCP-2 临界点干燥仪干燥，IB-5 离子溅射仪喷金，XL 30 环 境扫描电子显微镜观察并拍照。 1.2 透射电镜样品的制备 3 取雄性成熟疣吻沙蚕节片，样品大小在0.5-1 ㎜ 之间，用4 ℃的2.5 ％戊二醛前固定4 小时以上，再经4 ℃的1％四氧化锇后固定1 小时，2.5 ％戊二醛和1％四氧化锇都由pH7.4 的0.2 mol/L 磷酸缓冲液配制，双固定后经0.1 mol/L 磷酸缓冲液漂洗6 次，梯度酒精脱水， 1本课题得到广东省自然科学基金（032248）和华南农业大学与东莞市横向课题的资助。 -1- Epon812 环氧树脂包埋，Leica UCT 超薄切片机切片，切片厚90 nm，切片经醋酸铀和柠 檬酸铅双重染色，TECNAI G2 12 分析型透射电子显微镜观察并拍照。 2. 结果 2.1 疣吻沙蚕成熟精子的表面结构： 扫描电镜对雄性疣吻沙蚕成熟虫体断面进行观察，可见大量精子交错缠结 聚集在体腔中（图版Ⅰ，1），渐次将精子放大（图版Ⅰ，2-4 ）可见精子为典 型的鞭毛型，表面不光滑，头部外观呈半干的枣状，长约2-3µm ，宽约1.5-2µm， 没有分离到单个完整