贯叶连翘抗忧郁成分乾燥萃取程序之研究.DOC

貫葉連翹抗憂鬱成分乾燥萃取程序之研究 Study of Drying and Extraction Process for Hypericum Perforatum 研究生：鄭光廷 Guang-Ti Jeng 指導教授：謝欽城 Ching-Chen Hsieh 、 謝清祿 Ching-Lu Hsieh 陳錫金 Hsi-Jien Chen 【摘要】 台灣原生貫葉連翹植物又稱金絲桃(St. John’s Wort)，學名為Hypericum perforatum，研究顯示其萃取液主要成份hypericin及hyperforin具有抗憂鬱症之生理療效，若能提高貫葉連翹植物體中，抗憂鬱指標成分的乾燥與萃取效果，將可增加貫葉連翹植物之利用價值，提升農民栽種意願，並因此促進本土農業與醫藥界治療憂鬱症之實質能力，藉此加惠國內日益增加的憂鬱症病患。本研究針對貫葉連翹植物在不同乾燥處理條件、不同植株部位及不同萃取方法等實驗內容加以探討，以甲醇為萃取試劑，進行萃取後，萃取液經淨化處理，以液相層析儀(HPLC)進行分析抗憂鬱成分hyperforin及hypericin，HPLC分析hyperforin 是使用管柱RP 18(5 μm) 4.0 mm I.D.×15 cm，移動相為ACN：H2O：CH3COOH = 90：9.7：0.3，UV-vis Detector檢測波長為273 nm，移動相流量1.0 ml/min，注入量10 μl。分析hypericin成分，實驗所用的液相層析儀為API 3200液相三段四級桿串聯式質譜儀，使hypericin成分由層析管柱為ZORBAX-SB C18分離出來，Mass 503/405，波峯滯留時間為3.21分，移動相之調配為A：5mM 醋酸銨、B：氰甲烷，注入量為20 μl，移動相流速為0.9 ml/min。實驗結果顯示，70℃熱風乾燥可縮短乾燥時間並提升乾燥效率，平衡含水率為10.2% ；在低溫乾燥25℃條件下需乾燥22小時後，達到平衡，此時其含水率為20 %，因此70℃熱風乾燥縮短了乾燥時間也增進了乾燥效率。在不同植株部位，經乾燥處理及索氏萃取下hyperforin及hypericin濃度變化，根莖部位hyperforin濃度為24.4 mg/g、hypericin濃度為10.2 μg/g，葉部位hyperforin濃度為33.4 mg/g、hypericin濃度為19.8 μg/g，顯示抗憂鬱成分hyperforin及hypericin在葉片中比根莖部位多。在比較不同乾燥方法中，低溫乾燥25℃時，其hyperforin濃度為39.4 mg/g為低溫乾燥下最佳的萃取濃度，且低溫乾燥各濃度平均下，都高於熱風乾燥中最佳的濃度，為熱風乾燥40℃的方式，濃度34.8 mg/g，因此證實低溫乾燥方法對於乾燥貫葉連翹能獲取更多植物成分。在不同萃取方法中，低溫乾燥下則以索氏萃取比超音波萃取濃度較高；在分析hypericin濃度中發現，並沒有哪一種乾燥模式或是哪種萃取方法是特別好的，反而是經某種乾燥條件後要搭配某種萃取方法才有較高的濃度，例如經低溫乾燥後索氏萃取或是熱風乾燥後以超音波萃取，濃度明顯都比較高。貫葉連翹經乾燥萃取後，hyperforin濃度效果，以25℃低溫乾燥後經索氏萃取，hyperforin濃度為39.4 mg/g為最佳乾燥萃取濃度，而在hypericin濃度效果，以15℃低溫乾燥後經索氏萃取，hyperforin濃度為41.2 μg/g為最佳濃度，因此本實驗最佳方法，是在低溫乾燥15℃~25℃之間，以索氏萃取後 關鍵字：貫葉連翹、憂鬱症、hyperforin、hypericin、液相層析質譜儀 【Abstract】 An indigenous plant in Taiwan contains constituents of anti-depression was investigated in this study. The plant was defined in genus and species of Hyperricum perforatum (St. John’s wort). Anti-depressant bioactive compound from Hyperricum perforatum was identified to hyperforin and hypericin and Pseudohypericin. To enhance the dry and extraction efficiency would be improved the acceptance and medical value for the implement