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①动物细胞培养原理:____________。其过程所用培养基一般是_____培养基。 ②动物细胞培养时选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养,因为_________________________. ③动物细胞培养过程中两次用到____________,第一次的作用是___________________;第二次是_________________,目的是避免动物细胞的接触抑制。 ④将动物细胞分散成单个细胞培养的原因: 保证细胞所需要的营养供应。 保证细胞内有害代谢产物的及时排出。 1.(2014·课标卷Ⅰ,40) 研究者用抗原(A)分别免疫3只小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如下图所示。 制备杂交瘤细胞,取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条) 与体外培养的骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中,再加入PEG诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。 (1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上,则小鼠最少需要经过______次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的是________小鼠, 理由是______________________________________________________。 (2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有___________________________________________________,体系中出现多种类型细胞的原因是_____________________________________________。 (3)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是_____________________。 * 欢迎大家莅临指导 动物细胞工程 许玉娟 2018.1.10 2015江苏,3,2分 2014浙江,3,6分 2013浙江,6,6分 2014全国Ⅰ,40,15分 动物细胞融合与单克隆抗体的制备。(5%) 2016全国Ⅱ,40,15分 动物细胞培养与体细胞克隆(15%) 1.动物细胞培养与体细胞克隆。Ⅰ 2.细胞融合与 单克隆抗体。Ⅱ 3.生物技术中的伦理问题。 Ⅰ 自主命题地区 2014全国 2016全国 考点 考试大纲 考点一.动物细胞培养 单个细胞 细胞悬液 原代培养 传代培养 教材 P44-45 50代后 细胞癌变 2次胰蛋白酶 细胞增殖 液体 分化程度低,增殖能力强,更易于培养。 胰蛋白酶 将剪碎的组织分散成单个细胞 将贴壁细胞从瓶壁上分离下来 特 别 提 醒 微量元素 1.分析命题热图,明确答题要点 如图,为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线,图中B、E两点表示经筛选、分装后继续培养。据图分析: (1)原代培养和传代培养的分界点是哪个? (3)E点后细胞大多数具有异倍体核型,这样的细胞有什么特点? E点后的细胞属于细胞系,能无限增殖。 (2)AB段和DE段繁殖速度缓慢的原因是什么? B点之前的培养称为原代培养,之后的培养称为传代培养。 发生了接触抑制。 癌细胞 阅读题目 圈出关键词 分析考点 C 过程 条件 培养过程过程中 细胞变化 阅读题目 圈出关键词 分析考点 难 易 结果 选取10代以内的细胞,因为:___________________________。 一般能保持正常 的二倍体核型 学生活动:课本P48图,完成学案填空 重组细胞 重组胚胎 1.(2016·全国课标卷Ⅱ,40)下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物(二倍体)的流程。回答下列问题: (1)图中A表示正常细胞核,染色体数为2n,则其性染色体的组成可为________。过程①表示去除细胞核,该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行,去核时常采用______________的方法。 XX或XY 显微操作去核法 (2)经过多次传代后,供体细胞中________________的稳定性会降低。 因此,选材时必须关注传代次数。 (3)若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同,从遗传物质的角度分析其原因是________________________________________________。 (4)与克隆羊“多莉(利)”培养成功一样,其他克隆动物的成功获得也证明了 _________
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