《骨髓细胞检验》课件.pptVIP

三、骨髓涂片和染色 三、骨髓涂片和染色 制备良好的骨髓涂片是进行骨髓细胞检验的基础性工作，绝对不可忽视。有时骨髓取材良好，但由于玻片不清洁或推片技术不佳，而不能得到满意的涂片。若涂片太厚，细胞重叠，则无法辨识细胞的结构；涂片太薄，细胞过于分散，则影响检查速度和准确性，甚至漏诊或误诊。因此必须制备厚薄适宜、分布均匀和染色良好的涂片。 三、骨髓涂片和染色 （一）涂片制备 取骨髓液1滴置于载玻片的一端，将边缘平齐的推片（最好比载片稍窄或磨去两角）的一端放在骨髓液的前方，逐渐后移接触骨髓液，使骨髓沿推片散开，使推片与载片保持约30°角，平稳地向前推进至载片的另一端，载片上便留下一薄层骨髓液膜。涂片制成后，在空气中挥动，使其迅速干燥，以免细胞皱缩。 三、骨髓涂片和染色 （二）涂片的要求及注意事项 1．要保持玻片整洁，不能用手指触摸玻片表面。一张良好的骨髓涂片，要求厚薄适宜，头、体、尾明显，细胞分布均匀。 2．骨髓内纤维蛋白原含量高，易凝固，穿刺后应立即涂片。若明显有外周血混入，应先尽量将外周血吸去，再将沉淀下的有骨髓粒部分涂片。 三、骨髓涂片和染色 （二）涂片的要求及注意事项 3．涂片干燥后用铅笔在髓膜头部写上姓名、编号、日期。 4．骨髓液一般不用抗凝剂，若作细胞计数或其它检查，可用肝素抗凝，但用量不宜过多，否则影响细胞形态。 四、骨髓细胞分类和骨髓象观察 （一）低倍镜观察 （二）油镜观察 （三）结果计算 （四）血涂片观察 （五）骨髓象分析与报告 （六）骨髓象检验中应注意的问题 四、骨髓细胞分类和骨髓象观察 观察骨髓涂片，一般应先用低倍镜观察全片，了解基本情况。低倍镜观察全片后，再用油镜观察各细胞系形态，在熟悉涂片的基础上作细胞分类，在分类过程中继续观察细胞形态变化情况，最后分析结果。同时作血涂片观察，进行结果对照。 （一）低倍镜观察 1．全面观察涂片情况 要对骨髓涂片全面浏览，了解骨髓取材和涂片情况，观察细胞受色是否满意，若涂片情况较差，应另选良好涂片，并将情况填写记录。 （一）低倍镜观察 2．判断骨髓增生程度 骨髓涂片中有核细胞的多少，可大致反映骨髓造血的增生程度。除个别病例通过骨髓有核细胞直接计数来判定增生程度外，一般均以骨髓涂片中有核细胞与成熟红细胞的比例进行判断。据此可将增生程度分为5级。 （一）低倍镜观察 由于穿刺抽取骨髓时，只有稀释的可能而无浓缩的机会，因此检查结果介于两级之间时，可将其增生程度上提一级。例如结果在增生活跃与增生明显活跃之间，应判断为增生明显活跃。对增生减低的标本，应观察全部送检的骨髓片，以免遗漏有代表性标本，而误将外周血稀释的部分涂片认为增生减低。 （一）低倍镜观察 3．计数骨髓巨核细胞 在用低倍镜寻找巨核细胞时，要注意涂片的边缘及尾部，以1.5cm×3cm为一面积单位，计数其巨核细胞，如未找到巨核细胞，应再观察其他涂片，均未发现方可报告未找到巨核细胞。参考值7～35个，须在油镜下观察证实。必要时可用油镜进行巨核细胞分类。 （一）低倍镜观察 4．观察有无体积较大、异形或成堆的特殊细胞。如转移癌细胞、戈谢细胞、尼曼-匹克细胞、R-S（Reed-Sternberg）细胞、多核巨细胞以及红细胞有无缗钱状排列等。观察时要注意涂片的边缘及尾部。 5．了解造血岛的多少，结合油镜观察其中的细胞组成和形态。 （二）油镜观察 1．有核细胞分类 应选择涂片染色良好、细胞分布适当的部位计数，一般依次计数200个有核细胞，按细胞的种类、发育阶段分别记录，并计算其比值。增生明显活跃以上的骨髓，应分数400～500个有核细胞；增生减低、有核细胞很少时，可相应减少分类细胞数。 （二）油镜观察 2．观察各系细胞形态变化：仔细观察各细胞系的数量、细胞发育成熟度和形态是否正常。如有无大小不均、形态异常、巨幼变或巨幼样变、分叶过多、颗粒异常、毒性变、退行性变、有丝分裂细胞增多或异常等现象。 （二）油镜观察 （1）粒细胞系：除观察粒细胞系增生程度、各阶段细胞百分率和形态变化外，应同时注意嗜酸性、嗜碱性粒细胞的百分率和有无形态变异。 （二）油镜观察 （2）红细胞系：除观察红细胞系增生程度、各阶段细胞百分率外，还应注意中幼、晚幼红细胞胞质变化，晚幼红细胞脱核情况，有无巨幼红细胞出现和其他异常现象。同时注意观察成熟红细胞形态变化，如红细胞的大小、形态、染色及结构等，特别是贫血的病人，对诊断和鉴别诊断有一定的意义。 （二）油镜观察 （3）巨核细胞