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[解析] (1)牛肉膏、蛋白胨都含有N,可为微生物的生长提供氮源。制作无菌平板所用培养基为固体培养基,因此X应为琼脂。(2)由实验目的可知,该实验的自变量为教室的不同高度,因变量为微生物的分布情况,故实验组的操作应为将实验组平板分别放置在教室不同高度的位置上,开盖暴露一段时间。(3)空白培养基上出现菌落,说明培养基被污染了,即调查中出现了污染现象。实验过程中若培养基被污染,必须将其抛弃,重新制作新的培养基进行实验。 2.(2018·郑州二模)临床实验表明,服用乳酸菌及其制品具有减少人体血清胆固醇含量、降低心脑血管发病率的功效。下面是从酸奶中筛选出高效降低胆固醇的乳酸菌的实验,请回答下列问题: (1)制备固体培养基(MRS):在普通的液体培养基中添加碳酸钙和____________,加热使其熔化,然后转移到锥形瓶中。经___________________法处理后,待其冷却至50℃左右,在酒精灯火焰附近倒平板。 (2)将少量酸奶制成1︰10稀释液,再将梯度稀释到10-6的稀释液涂布于添加了碳酸钙的乳酸菌培养基(MRS培养基)平板上,在__________(填“有氧”或“无氧”)条件下37 ℃恒温培养72 h。挑取_____(填“有”或“无”)溶钙圈(或透明圈)的菌落,用____________法接种在MRS培养基上反复纯化至纯种备用。 琼脂 高压蒸汽灭菌 无氧 有 平板划线 (3)在普通的MRS液体培养基中添加适量________________并用超声波振荡乳化20 min,调pH至7.0,然后将纯化后的乳酸菌菌株接种到高胆固醇培养液中培养,一段时间后用特定显色剂分光光度法离心测定上清液中______________的含量,以________________________________作为对照,测定菌株降低胆固醇的能力,筛选出目的菌株。 胆固醇 胆固醇 未接种的高胆固醇培养液 [解析] (1)在液体培养基中加入凝固剂琼脂后,制成琼脂固体培养基。培养基应使用高压蒸汽灭菌法。(2)乳酸菌是厌氧微生物,需在无氧条件下培养。乳酸菌发酵产物为乳酸,乳酸溶解碳酸钙,产生透明圈,所以能产生透明圈的菌落为乳酸菌菌落,挑取后,用平板划线法接种纯化培养。(3)要从酸奶中筛选出高效降低胆固醇的乳酸菌,需在培养基中添加适量的胆固醇,接种培养后测定胆固醇的含量,并与未接种的高胆固醇培养液比较,测定菌株降低胆固醇的能力,筛选出目的菌株。 易错警示 有关选择培养基选择方法的3个错混点 (1)在培养基中加入某种化学物质。例如,加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌;加入高浓度的食盐可以得到金黄色葡萄球菌。这里的加入是在主要营养成分完整的基础上进行的。 (2)改变培养基中的营养成分。例如缺乏氮源时可以分离出固氮微生物;石油作为唯一碳源时,可以分离出能消除石油污染的微生物。 (3)改变微生物的培养条件。例如,将培养基放在高温环境下培养,可以得到耐高温的微生物。 题型2 传统发酵技术的应用 3.(2016·天津卷)天津独流老醋历史悠久、独具风味,其生产工艺流程如下图。 (1)在糖化阶段添加酶制剂需要控制反应温度, 这是因为酶______________________________________。 (2)在酒精发酵阶段,需添加酵母菌。在操作过程中,发酵罐先通气,后密闭。通气能提高______________的数量,有利于密闭时获得更多的酒精产物。 在最适温度条件下催化能力最强 酵母菌 (3)在醋酸发酵阶段,独流老醋采用独特的分层固体发酵法,发酵30天。工艺如下。 ①发酵过程中,定期取样测定醋酸杆菌密度变化,趋势如下图。据图分析,与颠倒前相比,B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是______________________________,由此推测,影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是______________________________。 先快速增长后趋于稳定 氧气、营养物质、pH ②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中,发酵缸中____________________________________________________层醋醅有利于乳酸菌繁殖,积累乳酸。 ③成熟醋醅中乳酸菌的种类明显减少,主要原因是发酵后期营养物质消耗等环境因素的变化,加剧了不同种类乳酸菌的___________________________,淘汰了部分乳酸菌种类。 颠倒前的B层和颠倒后的A(或不翻动,或下) 种间竞争(或竞争) [解析] (1)酶在最适温度、最适pH等条件下催化能力最强,所以添加酶制剂需要控制温度。(2)酵母菌在有氧条件下能大量繁殖,增加酵母菌数量,有利于密闭阶段在无氧条件下获得更多酒精产物,因而发酵初期应先通气。(3)①由图示
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