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DC-CIK细胞的制备方法
DC-CIK 细胞的制备方法
【背景】
CIK 是“Cytokine-Induced Killer Cells ”的缩写,中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。
CIK 是单个核细胞在CD3 单抗和多种细胞因子(包括IFN-γ, IL-2 等) 的作用下培养获得的一
+ +
群以CD3 CD56 细胞为主要效应细胞的异质细胞群,其既具有T 淋巴细胞强大的抗肿瘤活
性,又具有NK 细胞( 自然杀伤细胞) 的非MHC(主要组织相容性抗原) 限制性肿瘤杀伤能力。
CIK 细胞具有杀瘤活性高、杀瘤谱广,对正常组织毒性低,体外可高度扩增等特点,是目前
临床上广泛使用的过继性免疫治疗细胞。
DC 是“Dendritic Cells ”的缩写,中文全称为“树突状细胞”,因其成熟时伸出许多树
突样或伪足样突起而得名。DC 是由 2011 年诺贝尔奖获得者、加拿大籍科学家 Ralph M.
Steinman 于1973 年发现的,是目前发现的功能最强的抗原递呈细胞 (Antigen Presenting Cells,
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APC) 。已证实,DC 是唯一能够显著刺激初始 T 细胞(Naïve T cells)增殖的 APC ,而其它
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APC(如单核巨噬细胞,B 细胞等)仅能刺激已活化的或记忆性的T 细胞。DC 是机体适应性T
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细胞免疫应答的始动者,在肿瘤免疫中具有极其重要的作用。.
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DC-CIK 即DC 和CIK 细胞在体外共培养,然后回输给患者。严格的说,最终的效应细
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胞是经DC 体外活化的CIK 细胞。多项研究表明,DC 与CIK 具有协同作用,共同孵育后,
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DC 表面共刺激分子的表达及抗原递呈能力均明显提高,而CIK 的增殖能力和体内外细胞毒
o
活性也得以增强,因此DC-CIK 较单独的 CIK 治疗更为有效。若将肿瘤抗原负载的DC 与
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CIK 共培养,可刺激产生肿瘤抗原特异性的T 细胞,这样的DC-CIK 治疗则兼具特异性和非
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特异性双重肿瘤杀伤作用,比未负载肿瘤抗原的 DC 刺激活化的 CIK 活性更强,常被用于
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临床和科研。 p
w.
【培养原理】w
1.DC 培养用细胞因子:
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GM-CSF(粒细胞巨噬细胞集落刺激因子):
GM-CSF 是一种造血生长因子,在体外可刺激中性粒细胞和巨噬细胞的集落形成,
并具有促进早期红巨核细胞、嗜酸性祖细胞增殖和发育的功能。GM-CSF 是最早被鉴定
出来对于DC 有作用的细胞因子之一。
GM-CSF 在DC 培养中的功能是促进单核细胞向大巨噬样细胞分化,细胞表面MHC
II 类分子的表达得以提高,从而增强细胞的抗原递呈功能。此外,GM-CSF 还可促进
DC 的存活。
IL-4 (白细胞介素-4)
IL-4 在由单核细胞诱导成DC 的过程中发挥的作用是抑制巨噬细胞的过度生长,从
而引导单核细胞向DC 方向分化。若培养体系中不加IL-4 ,单核细胞将分化为巨噬细胞。
美国 Pepr
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