161121-血液系统疾病动物模型制备.pptVIP

* 1、缺铁性贫血动物模型 造模原理： 缺铁性贫血（iron deficiency anemia，IDA）是指各种原因引起的缺铁导致红细胞生成减少而导致的贫血。通过低铁饲料喂养动物使铁摄入减少，外加多次少量放血使铁丢失，造成体内铁的缺乏。 造模方法 实验动物：选用4周龄SD大鼠，雌雄不拘，体重65g左右，HGB≥130g/L。 建模方法：采用EDTA浸泡处理以去除饲料中的铁（低铁饲料）后喂养动物。 采用去离子水作为动物饮水，以排除饮水中铁离子的影响。 在低铁饲料饲喂2周后进行，常用尾静脉放血法，1～1.5ml/次，2次/周。 饲料中的含铁量是诱导IDA模型的关键：（1）饲喂含铁量15.63mg/Kg的饲料35天，SD大鼠出现典型IDA表现；（2）饲喂含铁40.30mg/Kg的饲料SD大鼠出现缺铁，但并不表现贫血症状。 模型指标：（1）HGB≤100g/L；（2）血象：红细胞体积较正常红细胞偏小，大小不一，中心淡染区扩大，MCV减小、MCHC降低；（3）血清铁降低，10μmol/L，血清总铁结合力增高，60μmol/L。 用于缺铁性贫血药物作用和缺铁性贫血机制的研究，但不适用于铁吸收不良相关的防治研究。 模型评估和应用 2、溶血性贫血动物模型 溶血性贫血(hemolytic anemia,)是一种常见的贫血类型，是指由于某种原因使红细胞存活期缩短(15-20天），破坏增加，超过了骨髓代偿能力（6-8倍）所引起的一类贫血，是常见的造血系统疾病。 造模原理： 动物注射一定量的乙酰苯肼(acetylphenylhydrazine, APH)，APH是一种强氧化剂，能特异性地对红细胞起缓慢而进行性地氧化损伤作用，尤其是干扰红细胞内的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶，促进血红蛋白变性而形成海氏小体，也可直接破坏红细胞的膜蛋白和脂类，使膜溶解破裂，红细胞崩解，造成溶血性贫血。 造模方法： 小鼠第1、4、7 天皮下注射APH生 理 盐水溶液 0.2g/kg、0.1g/kg、0.2g/kg，第9天造模成功，其 他给药方法也可以造成此模型。 大鼠 第1、4 天 皮 下 注射 APH 生理盐水溶液 0.16g/kg、0.08g/kg，第8天造模成功；或两次剂 量均为0.2g/kg，第10天造模成功。 家兔 以2％APH生理盐水溶液给实验动物皮下或 肌内注 射 2～3次，剂量为 0.1g/kg，即可建立溶 血性贫血模型。 外周血血红蛋白和红细胞进行性下降；网织红细胞、海氏小体和白细胞总数则显著增多。 本方法建模周期短，操作简便，模型动物症状和外周血象、血细胞的生化学变化与人类溶血性贫血基本相似，为研究实验性溶血性贫血提供了一种简易模型。 模型评估和应用 3.失血性贫血动物模型 造模原理： 急性失血后贫血(posthemorrhagic anemia)是快速大量出血引起的贫血；慢性失血后贫血是由于长期中度出血所致的小细胞性贫血。 通过人为放血导致动物血容量和血细胞的减少，从而导致动物出现短期的贫血特征，以此制作失血性贫血模型。 造模方法： 小鼠:?眼眶后静脉丛放血6～8滴(约0.5ml)，隔日 放血1次，连续5次可形成慢性失血性贫血模型。 每天剪尾放血0.5ml，连续7天，也可造成贫血。 大鼠:?大鼠剪尾放血1.5～2ml，隔日1次，连续5 次，可形成慢性失血性贫血。 家兔或犬: ?从动物静脉或者动脉采集全血容量的 1/3，每天1次，反复几次，即可造成失血性贫血 动物模型。 模型评估和应用： 通过较短时间内向体外大量放血，造成急性失血性贫血。也可通过反复多次放血，造成慢性失血性贫血。 该方法操作简单，指标明确，但样本间失血量较难控制完全一致。该模型用于一般失血性贫血的发病机制及其新药药效学筛选研究。 4、再生障碍性贫血动物模型 再生障碍性贫血（aplastic anemia），简称再障，系多种病因引起的造血系统退行性变，红骨髓总容量不断减少，黄骨髓不断增加，造血衰竭，以全血细胞减少为主要表现的一组综合征。建模方法包括化学建模、物理建模及免疫介导等。再障的发病机制尚未完全阐明。 化学方法建模： 造模原理： 化学药物的毒副作用抑制骨髓造血功能，诱导再生障碍性贫血。 腺嘌呤可导致肾脏病变，使促红细胞生成素（EPO）分泌不足，进而导致红系和巨核系造血障碍。 白消安可选择性抑制骨髓。 苯类化学物质进入动物体内后，在骨髓富集（可达血清浓度的20倍），对骨髓有较强的抑制作用，可导致再障。 腺嘌呤致大鼠肾性贫血模型： 实验动物：SD大鼠，雌雄不拘。 利用饲喂含腺嘌呤0.75%