缺氧对人乳腺癌细胞微球体生长及化疗耐药性的影响.docVIP

缺氧对人乳腺癌细胞微球体生长及化疗耐药性的影响 范原铭，屈洪波，吴诚义，侯 婧，韩明利 （400016 重庆，重庆医科大学附属第一医院内分泌乳腺外科） [摘要] 目的 研究缺氧对人乳腺癌细胞微球体（MSs）培养效率及其化疗耐药性的影响。方法 分别在常氧及缺氧条件下对人乳腺癌MDA-MB-231细胞进行无血清悬浮培养，观察记录MSs的生长速率及体积变化。MTT比色法检测各组人乳腺癌微球体细胞（mammospheres-derived cells，MSDCs）及MDA-MB-231细胞在不同浓度、不同药物作用下的存活率（survive Rate，SR）。免疫组织荧光化学法检测HIF-2α、ABCG2在各组MSDCs中的表达。Western blot检测乳腺癌干细胞标志物CD44及ALDH1在各组MSDCs中的表达。Western blot及Real-time RT-PCR检测HIF-2α、ABCG2、P-gp及MDR1在各组MSDCs中的表达。结果 缺氧组MSs生长速率及球体体积优于常氧组。缺氧组MSDCs在不同化疗药物作用下的SR高于常氧组MSDCs及MDA-MB-231细胞（P＜0.05）。免疫组织荧光化学检测发现HIF-2α及ABCG2在缺氧组MSDCs中的表达强于常氧组。Western blot检测发现CD44与ALDH1在缺氧组MSDCs中表达量高于常氧组。