几丁质酶对的活性改良及固定四化研究-生物化学与分子生物学专业毕业论文.docxVIP

华中农业大学2016届硕士研究生学位论文2．1．2．4酶连 华中农业大学2016届硕士研究生学位论文 2．1．2．4酶连 18 2．1．2．5大肠杆菌感受态的制备 ．18 2．1．2．6电转化 ．．19 2．1．2．7随机突变库质量检测 ．19 2．1．3 随机突变库的筛选 1 9 2．1．4 野生型和突变蛋白的诱导表达和纯化 19 2．1．5 蛋白SDS．PAGE检测 ．20 2．1．6 蛋白浓度测定 21 2．1．7 几丁质酶野生型Pachi和突变体PachiN35D酶学性质研究 22 2．1．7．1 N．乙酰氨基葡萄糖标准曲线的绘制 22 2．1．7．2几丁质酶活测定 ．22 2．1．7．3几丁质酶野生型和突变体最适反应温度测定 ．22 2．1．7．4几丁质酶野生型和突变体最适pH测定 ．．22 2．1．7．5几丁质酶野生型和突变体热稳定性测定 ．23 2．1．7．6几丁质酶野生型和突变体pH耐受性测定 ．．23 2．1．7．7金属离子对几丁质酶野生型和突变体活性的影响 ．23 2．1．7．8几丁质酶野生型和突变体动力学常数测定 ．23 2．1．8 几丁质酶野生型和突变体蛋白结构模拟 ．23 2．1．9 几丁质酶突变体对秀丽隐杆线虫的毒性研究 24 2．1．9．1秀丽隐杆线虫培养 ．24 2．1．9．2几丁质酶突变体对秀丽隐杆线虫致死率的测定 ．24 2．1．9．3几丁质酶