第五章 生物制品制造工艺2.pptVIP

§3 DNA重组药物 尽量去除污染病毒、核酸、宿主细胞杂蛋白等杂质，并避免在纯化过程带入有害物质 纯化每一步应测定纯度、计算提纯倍数、收率等等 1）、产品的鉴别 氨基酸组成分析： 肽图分析： N末端和C末端氨基酸测序： 蛋白质二硫键的分析： 重组蛋白相对分子量： 等电点的测定： 2）、纯度分析：SDS, CE, IEF, HPLC 3）、生物活性测定 4）、残余杂质检测 宿主细胞蛋白含量、宿主细胞DNA、残余抗生素等 5）、安全性检测 无菌实验、热原实验、毒性实验、免疫原性检查 A 体内生物学活性测定方法 生物学模型 生长激素 大鼠 脑垂体 B 体外生物学活性测定方法 如： MTT法: MTT formazan (蓝紫色) 干扰素类蛋白：可用细胞毒抑制试验来测定干扰素的体外活性。 琥珀酸脱氢酶 五、重要的重组DNA药物 （一）利用重组大肠杆菌生产医用蛋白或多肽 代表产品：重组人胰岛素、重组人生长激素、重组人干扰素、重组人白细胞介素、重组人集落刺激因子、重组抗体及其片断等。 效率高、产量大 周期短、成本低 工艺稳定、质量可控 缺点是易形成包含体 1）、干扰素（IFN-α、β、γ） 1957年Isaccs等发现病毒干扰现象，即病毒感染的细胞能产生一