N-乙酰半胱氨酸对糖氧剥夺诱导星形胶质细胞损伤抑制作用.PDFVIP

N-乙酰半胱氨酸对糖氧剥夺诱导星形胶质细胞损伤的抑制作用及机制 研究  卢理英 1 ，彭潇 1,2 ，张旭 2*(1.丽水市中心医院神经内科，浙江 丽水 323000 ；2.温州医科大学附属第一医院神经内科，浙江 温州 325000) 摘要：目的 探讨 N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-L-cysteine ，NAC)对糖氧剥夺(oxygen and glucose deprivation ，OGD)诱导的星 形胶质细胞损伤过程中 AKT 信号通路的影响及其意义。方法 以原代培养的星形胶质细胞建立 OGD 模型，并分为 4 组： 对照组，OGD 组，NAC 组和 NAC+ AKT 特异性抑制剂 MK-2206 组(NAC+MK-2206 组) ；细胞培养 24 h 后，采用噻唑蓝 (MTT)法检测细胞存活率、流式细胞仪技术分析细胞凋亡比例，试剂盒检测细胞内 SOD 活性和丙二醛(MDA)含量，蛋白 免疫印迹法检测细胞内 AKT 、磷酸化 AKT(p-AKT) 、mTORC1 、磷酸化 mTORC1(p-mTORC1) 、胞浆型磷脂酶 A2(cLPA2) 、 caspase3 及 Bcl-2 的表达水平。结果 与 OGD 组相比，NAC 组的细胞存活率，p-AKT 、p-mTORC1 及 Bcl-2 表达和 SOD 活性增加，细胞凋亡比例，cPLA2、caspase3 表达，MDA 含量降低。与 NAC 组相比，NAC+MK-2206 组的细胞存活率， p-AKT 、p-mTORC1 及 Bcl-2 表达和 SOD 活性降低，细胞凋亡比例、cPLA2、MDA 含量、caspase3 表达增加。结论 NAC 缓解 OGD 诱导 AKT 信号通路抑制作用，降低 cPLA2 诱导细胞凋亡作用。 关键词：N-乙酰半胱氨酸；AKT 信号通路；星形胶质细胞；糖氧剥夺 中图分类号：R964 文献标志码：A 文章编号：1007-7693(2018)09-1290-05 DOI: 10.13748/ki.issn1007-7693.2018.09.004 引用本文：卢理英, 彭潇, 张旭. N-乙酰半胱氨酸对糖氧剥夺诱导星形胶质细胞损伤的抑制作用及机制研究[J]. 中国现代 应用药学, 2018, 35(9): 1290-1294. Study of Protect Effect and Its Medhanism of N-acetyl-L-cysteine Protecting Astrocyte Injury Induced by Glucose and Oxygen Deprivation LU Liying1, PENG Xiao1,2, ZHANG Xu2*(1.Department of Neurology, Lishui Municipal Central Hospital, Lishui 323000, China; 2.Department of Neurology, the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University, Wenzhou 325000 ,China) ABSTRACT: OBJECTIVE To investigate the role of AKT signaling pathway in protecting cell injury by N-acetyl-L-cysteine(NAC) induced by oxygen and glucose deprivation(OGD) in astrocytes. METHODS The astrocytes were used to establish an OGD model. The astrocytes were divided into four groups including control group, OGD group, NAC group and NAC+MK-2206 group. MTT was used to detect cell survival rate. Apoptosis was analyzed by flow cytometry. SOD activity detection kit