第七章高尔收基复合体与细胞分泌.docVIP

PAGE PAGE 1 第四节 高尔基复合体与细胞分泌 名词解释：潴泡 高尔基复合体 cis网 Trans网 连续分泌 不连续分泌 分拣作用 N-连接寡糖(N-linked oligosaccharides ) 、O-连接寡糖(O-linked oligosaccharides) 一、高尔基复合体的形态结构 高尔基体顺面的网络结构（cis Golgi network，CGN），是高尔基体的入口区域，接受由内质网合成的物质并分类后转入中间膜囊。 高尔基体中间膜囊（medial Gdgi），多数糖基修饰，糖脂的形成以及与高尔基体有关的糖合成均发生此处。 高尔基体反面的网络结构（trans Golgi network，TGN），由反面一侧的囊泡和网管组成，是高尔基体的出口区域，功能是参与蛋白质的分类与包装，最后输出。 电子显微镜下看到的高尔基器由光滑膜组成，其显著特征是：由扁囊堆叠而成，一般由3—8个扁囊构成，每个扁囊有一底部，边缘垅起象一摞碟子。扁囊内充满无定形或颗粒状内含物。在腺体细肌中，高尔基体有明显的极性，靠近细胞核的一面为顺面扁囊群，代号CGN，它的扁囊弯曲凸起，又称凸面或形成面；面向细胞膜的一面，为反面扁囊群，代号TGN，它的扁囊凹陷，又称凹面或成熟面；顺反面中间为中间扁囊群，代号MGN。 顺面扁囊（CGN）可接受来自内质网新合成的物质，并将其分类后大部分转入高尔基体的中间扁囊，小部分蛋白与脂类再返回内质网，返回内质网的蛋白质具有特定的信号序列－—KDEL（赖一天冬一谷一亮），它是留驻在内网质内蛋白的特有序列。 中间扁囊（MGN）主要是进行糖的合成与修饰，大多数糖基化修饰，糖脂形成及多糖合成都在中间扁囊完成。 反面扁囊（TGN）的主要功能是参与蛋白质分类与包装，最后再将蛋白质从高尔基体中运出。 从CGN→MGN→TGN是一条高度有序的流水作业线，CGN接受分选半成品，再转给MGN加工修饰，然后将产品转给TGN，最后由TGN分类包装后运出。因此由顺面→反面，逐一推进，渐次发展，每一特征性扁囊都有不同的酶系统，催化不同的酶促反应，完成不同的功能。 在高尔基体周缘还有一些大小不等的囊泡。现已确定，小囊泡来源于内质网，由糙面或连续的光面内质网出芽形成的，小囊泡运动到CGN经识别与高尔基体CGN融合；反面一侧的大囊泡是经高尔基体扁囊群加工修饰再通过TGN出芽被包装形成的，小囊泡膜厚6.0-6.5nm与内质网膜相近，大囊泡膜厚7.5-8.5nm与质膜相近。因此，从内质网→高尔基体→质膜的过程中，囊膜在逐渐地加厚，囊中成分也在逐渐的更新。 一、高尔基复合体的形态、大小和分布均有很大的差异。 二、在大多数脊椎动物细胞中，高尔基复合体为复杂的网状结构。 三、在三维空间上，由一摞封闭的紧密叠置在一起的碟形膜围扁囊构成。 高尔基体各部分膜囊具有不同的细胞化学反应：①嗜锇反应，经锇酸浸染后，高尔基体的cis面膜囊被特异地染色；②焦磷酸硫胺素酶(TPP酶)的细胞化学反应，可特异地显示高尔基体的trans面的1～2层膜囊；③烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶(NADP酶)的细胞化学反应，是高尔基体中间几层扁平囊的标志反应；④胞嘧啶单核苷酸酶(CMP酶)的细胞化学反应，常常可显示靠近trans面上的一些膜囊状和管状结构，CMP酶也是溶酶体的标志酶，溶酶体就是在此处分泌产生的。 一、嗜锇反应区 顺面潴泡标志 二、烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶(NADP酶)反应区 中间层潴泡标志 三、胞嘧啶单核苷酸酶(CMP酶)反应区 成熟面潴泡标志 四、硫胺素焦磷酸酶(TPP酶)反应区 反面潴泡标志 高尔基池中含有的寡糖链加工酶：甘露糖转移酶 N-乙酰半乳糖转移酶 N-乙酰葡萄糖胺转移酶 岩藻糖转移酶 半乳糖转移酶 唾液酸转移酶 二、 高尔基复合体的功能 分泌作用 细胞中具有分泌作用的细胞器较多，起主导作用的是高尔基体。20世纪70年代卡罗（Caro）以豚鼠的胰脏腺泡细胞为材料，用3H-亮氨酸进行脉冲标记，发现标记3min后放射自显影的银粒在内质网中，20min后银粒主要出现在高尔基体中，120min后位于分泌囊泡并开始从腺泡细胞顶端释放。该实验说明分泌蛋白从内质网到高尔基体的合成与转运途径。其分泌过程为： ER→出芽→小囊泡→运动→CGN→鉴别→分选→MGN→修饰加工→浓缩→包装→TGN→出芽→大囊泡→运动→质膜→外排 酶原颗粒的形成（酶原颗粒的形成顺序：）；连续分泌(continuous secretion)；不连续分泌(discontinuous secretion)；蛋白质分拣(sorting)作用 内质网驻留蛋白的回运机制： 2．对分泌部的修饰加工 1）．切割 某些蛋白前体物质需经过切割才能变成成熟分子。