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草莓果实总RNA提取方法的比较.PDF

中国农学通报 2015,31(31): 146-149 Chinese Agricultural Science Bulletin 草莓果实总RNA提取方法的比较 张 卿,刘 帅,邢 宇,曹庆芹,秦 岭 (北京农学院农业应用新技术北京市重点实验室,北京102206) 摘 要:为建立草莓果实总RNA 的提取方法,针对草莓成熟果实中富含多糖、多酚和色素等次级代谢物 质,总RNA 提取难度大的特点,比较改良的EASYspin 植物RNA 提取试剂盒法和改良的CTAB 法提取 草莓果实中总RNA 的质量。通过琼脂糖凝胶电泳和核酸蛋白测定仪(NanoDrop 2000)检测2 种方法提 取总RNA 的浓度、纯度及完整性等。改良的EASYspin 植物RNA 提取试剂盒法和改良的CTAB 法都能 够完成草莓果实总RNA 的提取,电泳检测在28S 和18S 处呈2 条清晰的条带,OD260/OD280 值和OD260/ OD230 值均在2.0 左右;改良的EASYspin 植物RNA 提取试剂盒法成本较高,且提取总RNA 质量劣于改 良的CTAB 法,但是EASYspin 植物RNA 提取试剂盒法操作简便,安全可靠,节省时间。通过RT-PCR 验 证,2 种方法所获得的草莓果实总RNA 质量较好,可达到分子生物学试验对RNA 质量的要求。 关键词:草莓;总RNA 提取;RNA 提取试剂盒法;改良的CTAB 法 中图分类号:S668.4 文献标志码:A 论文编号:cas ComparisonofExtractionMethodsofTotalRNAfromStrawberryFruits ZhangQing,LiuShuai,XingYu,CaoQingqin,QinLing (BeijingKeyLaboratoryofNewTechnologyinAgriculturalApplication,BeijingUniversityofAgriculture,Beijing102206) Abstract: ItisdifficulttoextracttotalRNAfromstrawberryfruits sincethe fruitsarerichinphenols, polysaccharideandothersecondarymetabolismsubstances.Inordertoestablishamethodforextractingtotal RNAfromstrawberryfruits,modifiedCTABmethodandmodifiedEASYspinplantRNAextractionkitsmethod were compared. The concentration, integrity and purity of total RNA were detected by the agarose gel electrophoresisandnucleicacid/proteinassay(NanoDrop2000).Theresultsshowedthatbothmethodswerefit forextractinghigh-qualityRNAfromstrawberryfruitswithtwodistinctelectrophoresisbandsof 28Sand 18S. BoththeOD260/OD230 valuesandtheOD260/OD280 valueswere2.0above.ModifiedCTABmethodwascheapand of high-quality,butmodifiedEASYspinplantRNAextractionkitsmethodwassimple,safeandrapid.RT- PCRanalysisshowedthatextractedtotalRNAcouldbeappliedtogenecloningandoth

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