蛋白质工程讲义详解.docxVIP

蛋白质工程技术 实 验 讲 义 杨丙晔 厦门医学高等专科学校 目 录 技术路线介绍与实验试剂准备……………………………..….…2学时实验一 蛋白质的原核诱导表达及SDS胶的配制…….4学时 实验二 蛋白质SDS电泳………………………………..4学时 实验三 电泳胶的染色…………………………………….……..3学时 实验四 表达菌液的破碎和总蛋白的提取…………….……..…4学时 实验五 表达蛋白浓度的测定………………………………….. 3学时 实验六 金属螯合层析纯化外源表达蛋白………………...……6学时 实验七 纯化蛋白的透析……………………………….………. 3学时 实验八 组织蛋白的提取和电泳分离。。…………………….…3学时 实验九 Western blotting………………………….… ….…...….8学时 实验十 蛋白质组样品的质谱制备……………...……???………8学时 实验一 蛋白质的原核诱导表达及SDS胶的配制 一、实验目的 1、掌握蛋白质的原核诱导表达及诱导机理 2、熟悉SDS胶的配制方法 二、实验原理 利用乳糖的类似物IPTG对通过基因工程构建好外援表达基因进行蛋白的诱导表达，诱导的原理为乳糖操纵子调控原理： HYPERLINK /s?q=%E4%B9%B3%E7%B3%96%E6%93%8D%E7%BA%B5%E5%A