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Chapter 5 病毒的遗传分析 Genetic Analysis of Virus 病毒(virus)既不同于原核生物,也不居于真核生物,因为它们没有一般的细胞结构。在病毒中没有合成蛋白质外壳所必需的核糖体,所以只能寄生在动物、植物和细菌的细胞内繁殖,它能使宿主细胞的机构转而合成它自身新的病毒物质。尽管病毒能形成晶体,自身不能进行代谢等,但仍将病毒视为生物,因为它们能够繁殖。 病毒离开宿主细胞虽然不能繁殖,但仍可以存活。根据宿主细胞的不同而将病毒分为动物病毒、植物病毒和细菌茵病毒3种。细菌病毒又称噬茵体(phage)。 第一节 噬菌体的繁殖和突变型 2. 几种噬菌体的染色体特点 3. T4 噬菌体的结构 二、噬菌体的生活周期 6. 噬菌体组装 7. 宿主细胞破裂 二、噬菌体的繁殖 1951年,J. Lederberg 的妻子Esther lederberg证明了Lederberg和Tatum使用的K12 E.coli中含有原噬菌体,并命名为?。 10年后终于搞清了溶源化的实质。 二、噬菌体的繁殖 1.烈性噬菌体(virulent phages) 概念:感染细菌后立即在菌体内复制和合成蛋白质外壳,重新组装成噬菌体颗粒,并导致细菌细胞解体,释放出噬菌体。 繁殖:吸附在特异的受体上→酶→细胞壁形成微孔→注入核酸→停止细菌的代谢→合成phage的成分→裂解,释放。 烈性噬菌体溶菌 2. 温和噬菌体(temperate phage) 温和型噬菌体(temperate phage): 具有裂解和溶源两种途径 : (1)裂解途径:和烈性噬菌体相同 温和噬菌体溶源 (2)溶源途径:溶源周期经诱导进入裂解周期。 ?噬菌体的生活史 λ噬菌体:噬菌体侵入后,细菌不裂解,附在E.coli染色体上的gal和bio位点间的attλ座位上,通过交换整合到细菌染色体,并能阻止其它λ噬菌体的超数感染。 ②P1噬菌体:不整合到细菌的染色体上,而是独立存在于细胞质内。 原噬菌体:整合到宿主基因组中的噬菌体。仅少数基因活动,表达出阻碍物关闭其它基因。原噬菌体经诱导可转变为烈性噬菌体 裂解途径。 P1和λ噬菌体的生活周期特性 3、溶源性: 有些细菌带有某种噬菌体,但并不立即导致溶菌,这种现象称为溶源性,具有溶源性的细菌称为溶源性细菌(lysogenic bacteria),受温和噬菌体感染的细菌,几乎都成为溶源菌。在细菌中处于潜伏状态的噬菌体称为原噬菌体(prophage)或原病毒(provirus),带有原噬菌体的细菌称溶源性细菌(lysogenic bacterium),失去原噬菌体的细菌和为非溶源性细菌(non-lysogenic bacterium)。 三、噬菌体的突变型 噬菌斑(plaque):由于噬菌体的侵染,使细菌细胞裂解,有菌落上出现的一些园形而清亮的小洞。 1、快速溶菌突变体 (1)野生型r+形成小的噬菌斑1mm,周边有朦胧的光环。 原因 :有两个以上的噬菌体侵染一个细菌时,出现溶菌阻碍现象,混有裂解和未裂解的细胞。 (2)快速溶菌突变体r(rapid lysis)形成大的噬菌斑2mm,边缘清晰。 原因:无溶菌阻碍现象。 (3)鉴别:噬菌斑大小。 2、寄主范围突变体 (1)野生型h+ 能感染野生型的大肠杆菌Ttos,但不能感染Ttor (2)突变型h 对Ttos 和Ttor都能感染。 (3)鉴别 :混合Ttor 和 Ttos ,野生型h+出现混浊噬菌斑,突变型出现清亮噬菌斑。 (4)噬菌体与细菌的关系—侵染与抗性。 3、条件致死突变体 所谓条件致死突变型,就是在某些条件下,这些突变型是致死的,那么这些条件就称为限制条件(restrictive condition);而在另一些条件下仍可进行繁殖,从而得以扩增进行研究,所以这些条件称为许可条件(permissive condition)。 (1)“温度敏感”突变(temperature sensitive mutation): 野生型噬茵体能在很大的温度范围内感染宿主并进行繁殖。 ①热敏感突变型(heat sensitive mutants,ts):通常在30℃(许可条件)感染宿主进行繁殖,但在40一42℃(限制条件)条件下就是致死的,不能形成噬菌斑; ②冷敏感突变型(cold sensitive mutation,cs):在较低温度下就是致死的。 (2)“抑制因子敏感”突变(suppressor-sensitive mutation, sus): 实质是原来正常的密码子变成了终止密码子,因而翻译提前终止,不能形成完整肽链而
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