利用短片段同源替换sfhr技术进行位点特异修复cho细胞敏中游离的.docVIP

北京大学政学者论文集（2003年） 利用短片段同源替换（SFHR）技术进行位点特异性修复…… PAGE PAGE 114 利用短片段同源替换（SFHR）技术进行位点特异性修复CHO细胞中游离的缺陷型EGFP基因 生命科学学院 00级 贺晓路 摘要 传统的基因治疗主要采用基因扩增（gene augmentation）的策略，即向细胞中导入正常的靶基因表达序列，补偿细胞中缺陷型靶基因的功能。基因添加策略在遗传疾病的治疗中存在着严重的缺陷，从而限制了其临床应用。近年来发展起来的位点特异性基因修复（Site-specific Gene Correction）技术，如短片段同源替换技术（Small DNA Fragment Homologous Replacement，SFHR），克服了基因添加策略的缺点。位点特异性的基因修复技术源于对同源重组（Homologous Recombination ）的研究，即通过导入与正常靶基因同源的DNA短片段，通过细胞中的DNA修复或者同源重组的机制，特异性地修复缺陷型靶基因中的突变。利用位点特异性的基因修复技术不仅可以修复靶基因中存在的突变，而且能够在基因组中引入突变，因而在基因治疗和基因功能研究方面具有巨大的应用前景。目前，国际上关于短片段同源替换技术的研究处于实验阶段。本文中，我们利用短片段同源替换技术在中国仓鼠卵巢（Chine