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* * * * * * * * * * * * * * * * * 答:应从操作的各个细节保证“无菌”。例如,酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围等等。 问题讨论 涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求,想一想,第2步应如何进行无菌操作? (四).菌种的保存 接种到固体斜面培养基,菌落长成后置于4℃冰箱保存。 (三).微生物的恒温培养 ⑵.长期保存: 甘油冷冻管藏法 ⑴.临时保藏: 三.结果分析与评价 ㈠.培养基的制作是否合格 如果未接种的培养基在恒温箱中保温1~2d后无菌落生长,说明培养基的制备是成功的,否则需要重新制备。 ㈡.接种操作是否符合无菌要求 如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致,并符合大肠杆菌菌落的特点,则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中,无菌操作还未达到要求,需要分析原因,再次练习。 ㈢.是否进行了及时细致的观察与记录 培养12h与24h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同,及时观察记录的同学会发现这一点,并能观察到其他一些细微的变化。 营养类型 能源 氢的供体 基本碳源 微生物举例 代谢类型 光能无机营养(光能自养型) 光能有机营养(光能异养型) 化能无机营养(化能自养型) 化能有机营养(化能异养型) 光 光 无机物 有机物 无机物 有机物 无机物 有机物 二氧化碳 二氧化碳及简单有机物 二氧化碳 有机物 大多数已知细菌和全部真核微生物 硝化细菌 氢细菌 紫色非硫细菌 蓝细菌 绿色硫细菌 藻类 本课题知识小结: 【典例解析】 例:关于微生物营养物质的叙述中,正确的是( ) A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量 解析:不同的微生物,所需营养物质有较大差别,要针对微生物的具体情况分析。对于A、B选项,它的表达是不完整的。有的碳源只能是碳源,如二氧化碳;有的碳源可同时是氮源,如NH4HCO3;有的碳源同时是能源,如葡萄糖;有的碳源同时是氮源,也是能源,如蛋白胨。对于C选项,除水以外的无机物种类繁多,功能也多样。如二氧化碳,可作为自养型微生物的碳源;NaHCO3,可作为自养型微生物的碳源和无机盐;而NaCl则只能提供无机盐。对于D选项,无机氮源提供能量的情况还是存在的,如NH3可为硝化细菌提供能量和氮源。 D 例2:下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是( ) A.防止杂菌污染 B.消灭杂菌 C.培养基和发酵设备都必须灭菌 D.灭菌必须在接种前 解析:灭菌是微生物发酵过程的一个重要环节。A说的是灭菌的目的,因为发酵所用的菌种大多是单一的纯种,整个发酵过程不能混入其他微生物(杂菌),所以是正确的;B是错误的,因为灭菌的目的是防止杂菌污染,但实际操作中不可能只消灭杂菌,而是消灭全部微生物。C是正确的,因为与发酵有关的所有设备和物质都要灭菌;发酵所用的微生物是灭菌后专门接种的,灭菌必须在接种前,如果接种后再灭菌就会把所接菌种也杀死。 B * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 专题2 微生物的培养与应用 课题1 微生物的实验室培养 一.微生物基础知识 ㈠.微生物的概念 ◆微生物一般是指一切肉眼看不见或看不清的微小生物,个体微小,结构简单,通常要用光学显微镜和电子显微镜才能看清楚的生物的总称。 (二)微生物的类群 微生物 原核类: 真核类 非细胞类: 细菌、支原体、放线菌、蓝藻 酵母菌、霉菌、食用菌 真菌: 原生生物: 显微藻类、原生生物(如:草履虫、变形虫等) 病毒、类病毒、朊病毒 1.细菌的结构 (二)细菌 细菌主要是以二分裂的方式进行增殖(如右图) 2.细菌的繁殖 3.细菌的菌落 ⑴.定义: 单个或者少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,会形成一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体,叫做菌落。 ⑵.特征: 大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。 ⑶.功能: 每种细菌在一定条件下所形成的菌落,可以作为菌种鉴定的重要依据。 几种菌落及其形态 微生物需要的五大类营养要素物质是: (四).微生物需要的营养物质及功能 1.碳源 2.氮源 3.生长因子 4.无机盐 5.水 :凡是能为微生物提供所需碳元素的营养物质。 ①无机碳源:CO2;NaHCO3等 ②有机碳源:糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等 ①构成细胞物质和一些代谢产物 ②异养微生物的能源 ⑴.概念 ⑵.来源: ⑶.作用: 1.微生物的碳源 ①无机氮源:N2、NH4+、NO3-、NH3等。 ②有机氮源:尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等 凡是能够为微生物提供N
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