内皮素等受体拮抗剂改善小鼠糖尿病心肌纤维化的分子机制研究-心血管内科学专业毕业论文.docxVIP

解放军医学院硕士学位论文目 解放军医学院硕士学位论文 目 录 缩略词表 ．．1 中文摘要 ．2 英文摘要 ．4 -▲』_—L 刖 吾 6 内皮素受体拮抗剂改善小鼠糖尿病心肌纤维化的 分子机制研究 材料与方法 9 结耋日 果术 ．．1143l {寸 论 24 结 论 27 参考文献 ·28 文献综述 ·33 硕士期间发表文章、科研及获奖情况 40 致 谢 43 万方数据 解放军医学院硕士学位论文STZ 解放军医学院硕士学位论文 STZ Streptozotoc i n 链脲佐菌素 FBG fasting blood glucose 空腹血糖测定 VEGF vascular endothel ial growth factor血管内皮生长因子 TGF——13 transforming growth factor beta转化生长因子贝塔 CTGF connective tissue growth factor结缔组织生长因子 Collagen——1 collagen protein 1 胶原蛋白1 DM diabetes mellitus 糖尿病 ET endothel in 内皮素 FS fract i onal shorteni ng 缩短指数 MF myocardial fibrosiS 心肌纤维化 DCM diabetiC cardiomyopathy 糖尿病心肌病 IVS interventricularseptalthickness 室间隔厚度 LVESD left Ventricular end—systol ic Diameter左室收缩末期内径 LVEDD left ventricular end—diastol ic dimension左室舒张末期内径 LVPWD Left Ventricular Posterior Wal l Diameter 左室后壁厚度 EF ejection fraction 射血分数 ECM extracel lular matriX 细胞间质 万方数据 解放军医学院硕士学位论文内皮素受体拮抗剂改善小鼠糖尿病心肌纤维化的 解放军医学院硕士学位论文 内皮素受体拮抗剂改善小鼠糖尿病心肌纤维化的 分子机制研究 中文摘要 背景：糖尿病患者即使在血糖控制较好的情况下，糖尿病相关的并发症仍然有很 高的发病率。在糖尿病患者中，持续血浆中的高内皮素．1，已经被证实与心肌纤维 化的进展是密切相关的，这可能主要由细胞外基质聚集与纤维母细胞增殖引起。 由于内皮细胞功能障碍，主要是起源于内皮素．1，内皮素．1被人们认为在糖尿病的 并发症的病理生理学中起着重要的作用。然而，潜在的机制仍然不是很清楚。这 里我们假设内皮素．1可能促进心肌纤维化与心功能不全的进展。 目的：探讨内皮素受体拮抗剂对糖尿病心肌纤维化的潜在保护效应。 方法：将6周龄雄性C57BL／6小鼠分为3组：对照组、糖尿病组、糖尿病+波生 坦组，每组15只。链脲佐菌素(STZ)按70mg／kg单次剂量腹腔注射。在STZ 注射后即刻、1周、2周测定小鼠的空腹血糖，以确定糖尿病模型是否建立。在 STZ注射后第2天糖尿病+波生坦组小鼠灌胃内皮素受体拮抗剂波生坦 (100mg／kg)，其余两组灌胃等量的0．9％氯化钠溶液，每天1次直到24周。通过 形态学分析与电子显微镜评估心肌纤维化程度，应用反转录酶一聚合酶连锁反应去 检测血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子(TGF．p)、结缔组织生长因子 (CTGF)、及胶原蛋白1(collagen-1)的信使核糖核酸(mRNA)的表达，通过超 声心动图去评估心脏的收缩功能。 结果：24周后，测量小鼠的空腹血糖，糖尿病组与糖尿病+波生坦组接近(P0．05)， 两组血糖与对照组相比显著增高(P0．01)。HE染色表明，在糖尿病组心肌间质 有大量炎性细胞浸润、心肌间质纤维化及心肌细胞肥大，与糖尿病组相比，糖尿 病+波生坦组心肌纤维化明显减轻。通过Masson染色病理分析表明，在糖尿病组 心肌组织中纤维化改变十分明显，与糖尿病组相比，糖尿病+波生坦组心肌纤维 化明显减轻。电镜观察看到，在糖尿病组心肌组织中肌小节、肌原纤维层及线粒 体破裂，糖尿病+波生坦组肌小节、肌原纤维层及线粒体破裂较糖尿病组明显减 轻。VEGF及纤维化基因(TGF．B，CTGF and Collagen．1)与心肌纤维化密切相关。 2 万方数据 解放军医学院硕士学位论文与糖尿病组相比，糖尿病+波生坦组血管内皮生长因子的mRNA的表达增高，纤 解放军医学院硕士学位论文 与糖尿病组相比，糖尿病+波生坦组血管内皮生长因子的mRNA的表达增高，纤 维化基N(TGF-B，CTGF and Collagen．1)的mRNA表达降低(P0．01)