基于1h nmr代谢组学方法研究氟西汀对星形胶质细胞脂质和氨基酸代谢的影响-临床检验诊断学专业论文.docxVIP

重庆医科 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 Ast 英文全称 Astrocyte 中文全称 星形胶质细胞 CNS Central nervous system 中枢神经系统 Ct Threshold Cycle 阈值循环数 CUMS Chronic unpredictable mild stress 慢性轻度不可预见性的应激 DAPI 4,6-diamidino-2-phenylindole 4,6 二脒基-2-苯吲哚盐酸 ddH2O DMEM Double distilled water Dulbecco’s modified Eagle’s media 双蒸水 Dulbecco 改良的 Eagle 培养基 EDTA Ethylene diamine tetraacetic acid 乙二胺四乙酸 EP Eppendorf 微量离心管 FBS Fetal bovine serum 胎牛血清 FCM Flow cytometer 流式细胞术 GC-MS Gas chromatography-mass spectrometry 气相色谱-质谱联用 GFAP Glial fibrillary acidic protein 神经胶质原纤维酸性蛋白 h Hour 小时 HDL High density lipoprotein 高密度脂蛋白 LC-MS Liquid chromatography- 液相色谱-质谱联用 mass spectrometry LDL Low density lipoprotein 低密度脂蛋白 M Mole per liter 摩尔每升 MDD Major depressive disorder 重性抑郁症 min Minute 分钟 NMR Nuclear magnetic resonance 核磁共振 OD Optical density 光密度 OPLS-DA Orthogonal partial least 正交偏最小方差判别分析 squares discriminant analysis 1 PBS PCA PDL PH PLS-DA P/S Phosphate buffered saline Principal component analysis Poly-D-lysine Potential of hydrogen Partial least squares discriminant analysis Penicillin/Streptomycin 磷酸盐缓冲液 主成分分析 多聚赖氨酸 酸碱度 偏最小二乘判别分析 青/链霉素 rpm Revolutions per minute 转/分 s Second 秒 SREBP Sterol regulatory element-binding protein 固醇调节元件结合蛋白 SSRI Selective serotonin reuptake inhibitor 选择性 5-HT 再摄取抑制剂 TCA Tricarboxylic acid 三羧酸循环 TSP μl 3-trimethylsilylpropionic-2,2,3,3,-d4 -acid Micro liter 三甲基甲硅烷基丙酸 微升 VLDL Very low density lipoprotein 极低密度脂蛋白 2 基于 1H NMR 代谢组学方法研究氟西汀对星形胶质细 胞脂质和氨基酸代谢的影响 摘 要 目的：氟西汀是一种选择性 5-羟色胺再摄取抑制剂，是公认有效 的一种抗抑郁药物，广泛应用于临床。先前的研究表明，氟西汀的抗 抑郁机制与星形胶质细胞密切有关。然而，氟西汀对星形胶质细胞的 抗抑郁作用机制目前还不清楚。为此，本论文通过观察氟西汀对原代 星形胶质细胞相关代谢的调节作用，以探讨氟西汀对星形胶质细胞的 作用途径和相关机制。 方法：建立成熟、高效的星形胶质细胞原代培养方法，并通过细 胞增殖实验选择氟西汀处理星形胶质细胞的最佳有效浓度。用 10 μM 的氟西汀处理星形胶质细胞 24 h 后，应用 1H NMR 代谢组学技术以及 多元统计分析方法，分析细胞提取物中内源性代谢产物的变化规律。 结果： OPLS-DA 分析结果显示，药物组与对照组中的 17 种代谢 物指标有明显差别。与正常细胞对照组代谢产物相比，氟西汀可以引 起甘油三酯，脂质，低密度脂蛋白(LDL)，极低密度脂蛋白(VLDL)， 酪氨酸以及赖氨酸的量明显增加，而高密度脂蛋白(HDL)，糖蛋白，异 亮氨酸，葡萄糖，肌酸，天冬酰胺，甲硫氨酸，乙醇胺，甲胺和氧化 三甲胺的量明显降低。这些关键代谢物主要涉及脂质代谢和氨基酸代 3 谢。 结论：通过研究氟西汀处理的星形胶质细胞