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  • 2019-01-12 发布于江苏
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RNA提取结果解析

RNA提取结果分析 2006.04.28 100mg小鼠肝脏组织 ,液氮中研磨 ,组织碎末立即倒入3ml裂解液内 。加入苯酚后离心,分三管收集上层水相, TE稀释40倍测OD。 共收集1.5ml。 异丙醇沉淀后,可以看见大量白色沉淀,三管合并,600ul裂解液溶解沉淀,TE稀释160倍测OD。 此步共收集600ul。 异丙醇再次沉淀,75%乙醇洗涤两次, 尽量洗干液体,超净台干燥5min,加入100ulDEPC水溶解RNA。TE稀释40倍测OD。 RNA浓度为:1.23ug/ul,共有100ul,总产量为123ug。 100mg组织RNA的含量为400-700ug。 5ul裂解液对OD260有非常大的影响,RNA溶于水会导致OD260/280降低。 产率不高的原因: 1.研磨组织时有损失。 2.两次异丙醇沉淀会有大量损失。 3.乙醇洗涤时为避免长时间干燥,吸的很干。 没有计算出回收率,改进办法: 实验过程中测OD做控制时,使用5ul裂解液+195ulTE调零。 1%琼脂糖凝胶,旧的缓冲液。 10ulRN

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