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- 2019-01-11 发布于福建
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姓名:王连连导师:梁建生专业来:植物学
姓名:王连连 导师:梁建生 专业:植物学 有一些蛋白质可以以单体的形式发挥作用,但是大部分的蛋白质都是和伴侣分子或是与其他蛋白质一起发挥作用的。 举世瞩目的基因组计划使大量的新基因不断被发现,然而单纯的基因组DNA序列尚不能解答许多生命问题。基因是相对静态的,而基因编码的产物—蛋白质则是动态的,具有时空性和调节性,是生物功能的主要体现者和执行者。蛋白质的表达水平、存在方式以及相互作用等直接与生物功能相关。 在所有生命活动中,蛋白质之间的相互作用是必不可少的,它是细胞进行一切代谢活动的基础。细胞接受外源或是内源的信号,通过其特有的信号途径,调节其基因的表达,以保持其生物学特性。在这个过程中,蛋白质占有很重要的地位,它可以调控, 介导细胞的许多生物学活性。 融合蛋白pull-down实验 融合蛋白pull-down技术基本原理是将一种蛋白质固定于某种基质上(如Sepharose),当细胞抽提液经过该基质时,可与该固定蛋白相互作用的配体蛋白被吸附,而没有被吸附的“杂质”则随洗脱液流出。被吸附的蛋白可以通过改变洗脱液或洗脱条件而回收下来。 为了更有效地利用pull-down技术,可以将待纯化地蛋白以融合蛋白地形式表达,即将“诱饵”蛋白与一种易于纯化地配体蛋白相融合。1988年Smith等利用谷胱甘肽-S-转移酶(g
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