宜选用冰醋酸与醋酐混合溶剂.pptVIP

(二)气相色谱法 气相色谱法可用于某些具有挥发性、遇热不分解的生物碱及其盐类的分析，游离生物碱可直接进样，生物碱盐一般会在高温加热下，快速解离成游离生物碱后再进行色谱柱分析，但生物碱盐类在高温加热解离后所生成的酸容易损伤色谱柱和检测器，所以一般在测定前先用碱水碱化，再用有机溶剂提取分离，制得游离生物碱溶液后再进样分析。 四、提取酸碱滴定法 有些生物碱类药物由于其样品中其他组分对测定有干扰，测定前需经过碱化、有机溶剂提取后再进行酸碱滴定，称为提取酸碱滴定法。本法适用于碱性较强(pKb6～9)的生物碱盐类药物，这类成分水相即可达到明显的滴定突跃。经碱性试剂碱化、有机溶剂提取后，可采用酸碱滴定的方法测定含量。 五、荧光分析法 在紫外-可见光的激发下，有些生物碱或其化学反应产物能产生荧光，利用这一性质可用荧光分析法测定其含量。荧光分析法主要适用于制剂和体内药物分析，其具有灵敏度高、选择性好等优点但同时也存在干扰因素多、线性范围较窄等问题。如《中国药典》利舍平片的含量测定即采用本法。 第四节 含量测定 生物碱类药物由于品种多，结构多变，性质各异，可利用的含量测定方法也较多。原料药物的含量测定，主要是利用整个分子的碱性，根据其碱性强弱以及存在形式的溶解行为，多采用非水溶液滴定法；制剂的含量测定方法主要有紫外分光光度法(包括酸性染料比色法)、色谱法、提取酸碱滴定法、荧光分光光度法等。ChP2015中收载的常见生物碱及其制剂的含量测定方法见表12-2。 含量测定 (Assay) 非水溶液滴定法 非水溶液滴定法是在非水溶剂中进行的酸碱滴定测定法。主要用来测定有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐以及有机酸碱金属盐类药物的含量。也用于测定某些有机弱酸的含量。 一、非水溶液滴定法(弱碱性) 溶剂种类 （1）酸性溶剂：有机弱碱在酸性溶剂中可显著地增强其相对碱度，最常用的酸性溶剂是冰醋酸。 （2）碱性溶剂：有机弱酸在碱性溶剂中可显著地增强其相对酸度，最常用的碱性溶剂是二甲基甲酰胺。 （3）两性溶剂：兼有酸碱两种性能，最常用的是甲醇。 （4）惰性溶剂：溶剂没有酸碱性，如甲苯、三氯甲烷、丙酮。 一、非水溶液酸碱滴定法 (一)原理与方法 原理 生物碱类药物一般具有弱碱性，在水溶液中用酸滴定液进行直接滴定时没有明显的滴定突跃，难于掌握终点，不能顺利的滴定。而在酸性非水介质(冰醋酸、醋酐)中，生物碱的碱性显著增强，滴定突跃增大，滴定可顺利进行。 生物碱类药物绝大多数都以盐的形式供临床使用，即供分析用的多为生物碱盐类。其盐的滴定，实际上是一个置换反应，即用强酸滴定液置换出与生物碱结合的较弱的酸。 式中BH+·A-表示生物碱盐类，HA表示被置换出的弱酸。由于被置换出的HA酸性强弱不同，对滴定反应的影响也不同，若置换出的HA酸性较强，则反应不能定量的完成。因此在实际滴定中，必需根据具体情况，采取相应的测定条件，设法将HA除去或减少其产生，使反应顺利完成。 方法 除另有规定外，精密称取供试品适量[约消耗高氯酸滴定液(0.1mol/L ) 8 ml ]，加冰醋酸10～30ml使溶解。加各品种项下规定的指示液1～2滴，用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定。终点颜色以电位滴定时的突跃点为准，并将滴定的结果用空自试验校正。 (二)测定条件的选择 适用的范围及溶剂的选择 主要应用于pKb 8的有机碱性药物及其盐的含量测定。条件选用适当的pKb为8~13的弱碱均可采用。 对于碱性较弱的药物pKb为8~10时，宜选用冰醋酸， pKb为10~12时，宜选用冰醋酸与醋酐混合溶剂， pKb大于12时，就以醋酐为溶剂。 酸根的影响 在生物碱盐的滴定中，与之成盐的酸在冰醋酸中的酸性强弱对滴定能否顺利进行有关。各种酸在冰醋酸中的酸性强弱顺序为: 高氯酸氢溴酸硫酸盐酸硝酸磷酸有机酸 由此可见，如被置换出的是氢卤酸，其在冰醋酸中的酸性较强，对滴定终点有影响，需要进行处理。一般处理方法为在滴定反应开始前，预先在冰醋酸中加入醋酸汞的冰醋酸溶液，使氢卤酸生成在冰醋酸中难解离的卤化汞而排除干扰，然后再用高氯酸滴定液滴定。 当醋酸汞的量加入不足时，滴定终点仍不准确，会使测定结果偏低，一般加入量以其理论量的1～3倍为宜。然而醋酸汞是剧毒的化学物质，且严重污染环境，近年来生物碱类药物氢卤酸盐的非水溶液滴定法逐渐改用醋酐代替冰醋酸作溶剂，并以电位法指示终点，以避免使用醋酸汞。 终点指示方法 一般指示终点的方法有电位法和指示剂法。结晶紫由碱性区域到酸性区域的颜色变化为紫、蓝紫、蓝绿、绿、黄。 滴定液的稳定性 本法的溶剂冰醋酸具有挥发性，且膨胀系数较大，因此温度和贮存条件等都影响滴定液的浓度。需