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尿理学及湿化学检验 医学检验系 尿液pH测定 [原理] PH试纸是多种指示剂适当配合的试带，显色范围为棕红至深黑 [器材] 洁净试管或尿杯。 [试剂] pH广泛试纸1套(包括试带和标准色板)。 [标本] 新鲜尿液。 [操作] 将手洗净擦干或配戴手套，取试纸1条，将其一端浸入尿液约0.5s取出自然光线下与标准色板比色读取尿液pH。 [注意事项] 1．试带应密封、避光、干燥保存，远离酸性和碱性物质以防失效。 2．在规定时间内比色，1min内。 3．标本应新鲜，放置过久会因细菌繁殖或丧失挥发性酸而使pH增高。 尿比密测定（折射仪法） [目的] 　熟悉折射仪的工作原理、使用及校正方法。 [原理] 折射率与媒质的密度有关，密度越高，折射率越大；其次也与光的波长及温度有关。 经过大批量尿标本的研究，已经建立了折射率、比密和总固体量的经验公式，并将数字列成线图刻在目镜系列的适当位置中，测量时直接读数即可。 [器材] 临床折射计，尿杯、吸水纸、滴管、镊子。 [标本] 新鲜尿液。 [操作] ①零点校准 每次测试前必须用纯净水进行零点校准：向标本室中加入足够的蒸馏水，轻微调节旋转螺丝使边界线重合在1.000刻线上。 ②标本测定程序 拭干标本室和标本盖上的蒸馏水，在标本室内滴入足够的尿液，通过接目镜读取数值或查表得出结果。 [注意事项] 1．用过的滤纸、棉球等应及时焚毁，以免污染环境。 2．尿酸盐所致的浑浊可影响结果，需要加温溶解后再测定，切不可弃去。 3．细胞等有形成分增多时，应离心后测定上清液，测试完毕后用纯净蒸馏水擦拭干净。 尿蛋白测定（磺基水杨酸法） 目的 掌握尿蛋白定性的磺基水杨酸法原理及 操作 原理 在酸性条件下，磺基水杨酸的磺酸根离子 与蛋白质氨基酸阳离子结合，形成不容性 的蛋白盐沉淀，沉淀的程度可反映蛋白质 含量。 器材 小试管、滴管、吸管 试剂 200g/l磺基水杨酸溶液 标本 人工蛋白尿 操作 1．加尿液 取小试管2支，各加清晰尿液lml。 2．加试剂 于第1支试管内滴加磺基水杨酸溶 液2滴，轻轻混匀；另1支试管不加 试剂作空白对照，1min内观察结果。 3．判断结果 按P70表2-2判断阳性程度及蛋白 质的含量 注意事项 1．该法灵敏，极轻微反应无意义。判断结果应及时，否则会使阳性增高。 2．尿液偏碱时(pH9)，磺基水杨酸法可呈假阴性；尿液偏酸(pH3)也会引起蛋白定性假阴性。应先将尿液PH值调到5～6。 3．含碘造影剂、大剂量青霉素等也可使反应呈假阳性，但其反应与蛋白尿不同，应仔细观察并结合用药情况综合分析。 4．尽量指导患者采集中段尿，或离心后测定。 原理：根据葡萄糖氧化酶法反应原理，葡萄糖氧化酶特异性氧化葡萄糖，生成葡萄糖醛酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，使指示剂氧化而呈现颜色变化。 标本：新鲜尿 器材：一次性尿杯、尿糖试纸 尿葡萄糖定性检查 （一）尿糖试纸法 操作 １、将试纸的试垫区浸入样本中约２秒钟，并将其取出 ２、让试纸的边缘沿着样本容器口轻轻撩拭，以去除残余的尿液 ３、横握试纸，在３０～６０秒内与瓶签上的比色图谱比较，记录结果。试纸与标准色版相同颜色即为尿样的尿糖值，如反应颜色在两个标准色版颜色之间，则该尿样的尿糖值也介于两者之间。 注意事项 １、用清洁干燥的容器收集新鲜尿液并尽快检测，尿样在室温下的放置时间不可超过１小时，否则应将尿样保存在２－８℃冰箱中并在２小时内检测，不要在尿样中加防腐剂，尿样不可离心，测试前要将尿样混匀。 注意事项 ２、温度越低，反应所需要的时间要相应延长 ３、尿糖浓度时通过试纸由蓝色棕色的颜色变化来指示，蓝色为无尿糖，棕色越深，尿糖越高。 （二）班氏法（讲解） 目的 掌握班氏法原理方法 原理 葡萄糖或其他还原性的糖的醛基在热硷性溶液中，能将班氏试剂的兰色硫酸铜还原为黄色的氢氧化铜，进而形成红色氧化亚铜沉淀 器材 试管架、中试管、滴管、试管夹、酒精灯 试剂 班氏试剂 操作 1．鉴定班氏试剂质量 取中号试管1支，加入班氏试剂2.0ml，摇动试管徐徐加热至沸腾，观察试剂有无颜色及性状变化，若试剂仍为透明蓝色，可进行以下实验。 2．加尿液 向班氏试剂中加离心后的尿液0.2ml(约4滴)，混匀。 3．加热煮沸 继续煮沸1～