2019届高三一轮复习《基因工程》.ppt

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2019届高三一轮复习《基因工程》.ppt

一、基因工程的概念 二、DNA重组技术的基本工具 1.限制酶与DNA连接酶的关系 (1)限制酶和DNA连接酶的作用部位都是磷酸二酯键。 (2)限制酶不切割自身DNA的原因: 原核生物中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被 修饰。 2.与DNA分子相关的几种酶比较 选择限制酶 的注意事项 1.思考判断 (1)DNA连接酶可把目的基因与载体的黏性末端的碱基黏合,形成重组DNA。(  ) (2)E·coli DNA连接酶既可以连接平末端,又可以连接黏性末端。(  ) (3)Taq酶是用PCR仪对DNA分子扩增过程中常用的一种耐高温的DNA连接酶。(  ) 2.下列有关限制性核酸内切酶的叙述中正确的是(  ) A.用限制性核酸内切酶切割一个DNA分子中部,获得一个目的基因时,被水解的磷酸二酯键有2个 B.限制性核酸内切酶识别序列越短,则该序列在DNA中出现的几率就越大 C.—CATG↓—和—G↓GATCC—序列被限制酶切出的黏性末端碱基数不同 D.只有用相同的限制性核酸内切酶处理含目的基因的片段和质粒,才能形成重组质粒 3.(2017年广东对口升学模拟)限制性核酸内切酶MunⅠ和限制性核酸内切酶EcoRⅠ的识别序列及切割位点分别是—C↓AATTG—和—G↓AATTC—。如图表示四种质粒和目的基因,其中箭头所指部位为限制性核酸内切酶的识别位点,质粒的阴影部分表示标记基因。适于作为图示目的基因载体的质粒是(  ) 高考总复习 · 生物 高考总复习 · 生物 选修3 现代生物科技专题 第1讲 基因工程 考纲 要求 全国卷5年7考 高考指数★★★★★ 基因工程的诞生 Ⅰ 2016年新课标Ⅰ卷、 2016年新课标Ⅲ卷、 2015年新课标Ⅰ卷、2015年新课标Ⅱ卷、2014年新课标Ⅱ卷、2013年新课标Ⅰ卷、2012年新课标卷 基因工程的原理及技术(含PCR技术) Ⅱ 基因工程的应用 Ⅱ 蛋白质工程 Ⅰ 转基因生物的安全性 Ⅰ 热点透视 基因工程的操作步骤及原理;蛋白质工程的概念、目标和操作流程 ①可_________生物的遗传性状;②可克服远缘杂交不亲和性 优点 人类需要的__________或生物类型 结果 基因工程的原理 剪切→______→______→表达 基本过程 __________水平 操作水平 基因 操作对象 __________ 操作环境 基因拼接技术或__________技术 基因工程的别名 生物体外  DNA分子  拼接  导入  基因产物  定向改造  基因重组  DNA重组  黏性末端  原核生物  磷酸二酯键  磷酸二酯键  平末端  黏性末端  形成单链DNA分子 形成新的DNA分子 形成重组DNA分子 形成黏性末端或平末端 作用结果 将DNA两条链之间的氢键打开 只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上 将双链DNA片段“缝合”起来,恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 切割目的基因及载体,能专一性识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 作用特点 碱基对间的氢键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 磷酸二酯键 作用部位 DNA 分子 脱氧 核苷酸 DNA 分子片段 DNA分子 作用底物 解旋酶 DNA聚合酶 DNA连接酶 限制酶 项目 自我复制  目的基因  质粒  (1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类 ①所选的限制酶不能破坏目的基因。 ②所选的限制酶不能全部破坏标记基因,至少要保留1个标记基因。 ③切割质粒的限制酶要与切割目的基因的限制酶一致,以确保具有相同的黏性末端。 ④为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接,可使用两种不同的限制酶分别切割目的基因和质粒,如图甲可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种限制酶的切点)。 三、练习 B  A      B      C      D A 4、大肠杆菌及质粒载体的结构 模式图,据图回答。 能够自我复制 具有遗传特性 DNA DNA连接酶 标记基因 供重组DNA的鉴定和选择 能够自我复制 具有遗传特性 能够自我复制 具有遗传特性 能够自我复制 具有遗传特性 编码蛋白质  基因文库  mRNA反转录  DNA合成仪  PCR  2.基因表达载体的构建——基因工程的核心 (1)目的:使目的基因在受体细胞中__________,并且可以______________,同时使目的基因能够表达和发挥作用。 (2)基因表达载体的组成 稳定存在  遗传给下一代  RNA聚合酶  转录  转录  目的基因  基因工程中的3个易错点 (1)基因表达载体≠载体:基因表达载体与载体相比增加了目的基因。 (2)目的基因的插入位点不是随意的:基因表

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