基于arm的环介导等温扩增及检测系统的研制-生物医学工程专业论文.docxVIP

独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。尽我所知，除文中已经标明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或 集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出贡献的个人和集体，均已在 文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名： 日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。 本人授权华中科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检 索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本论文属于 保密□，在 年解密后适用本授权书。 不保密□。 （请在以上方框内打“√”） 学位论文作者签名： 指导教师签名： 日期： 年 月 日 日期： 年 月 日 华 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 I I 摘 要 基因扩增仪是生命科学领域重要的仪器设备，在基因研究中起着重要的作用。 但是目前我国的基因扩增仪研究成本较高，性能指标也不及国外，因此导致大部分 采用进口。研究智能化与便携化的基因扩增仪具有重要意义，也是一个重要的发展 趋势。环介导等温扩增（LAMP）是一种新颖的核酸等温扩增方法。相比传统聚合酶 链反应（PCR）能避免温度循环带来的困难，具有高灵敏度、高特异性和检测简单 的优点。 本文基于 LAMP 反应，以便携化、智能化、高通量和易集成为原则，搭建了基 于 LAMP 的温度控制系统以及扩增产物的光检测系统。采用旋转滑移芯片作为样品 载体，搭建 LAMP 扩增的恒温装置，使用半导体热电制冷器对装置进行加热和制冷。 设计以 LED 为激发光源，光电二极管采集荧光的光学装置，对芯片中样品进行激发 和信号采集。 ARM 处理器的性价比高并且速度快，广泛应用于控制领域。系统利用基于 Cortex-M3 内核的 ARM 处理器（STM32），设计了温度控制电路、小信号调理电路、 LED 恒流驱动电路、液晶显示以及按键和指示电路等。采用温度传感器 DS18B20 测 温并反馈给处理器。鉴于扩增反应的精度要求，软件部分使用了 PID 控制算法。通 过传感器反馈的实时温度值以及内置 PWM 输出来驱动半导体制冷器加热和制冷。 本系统对光电小信号的处理采用了硬件滤波和巴特沃斯软件滤波相结合的办法。软 件滤波能克服硬件滤波不彻底和易受干扰的缺点。经过实验测试，本系统能够长时 间稳定运行。温度控制精度达±1oC；光检测系统对钙黄绿素检测限达 2μM，满足 LAMP 温度控制和检测的要求。最后完成模块的安装和调试，形成一种便携式 LAMP 扩增与检测样机，结构紧凑，工作性能稳定。在样机中对病原体进行扩增和检测实 验，检出率达 100%，达到预期效果。 关键词：LAMP；温度控制；荧光检测；ARM；PID；芯片 II II Abstract Instruments for gene amplification play an important role in gene research, which are also one of the basic equipments in the field of life science. In our country, the development of gene amplification instrument is highly costly, and the performance index of such instrument is not as good as its imported counterparts. Thus, most gene amplification equipments are imported. Therefore, it is crucial to develop integrated and portable equipment for gene amplication. LAMP stands for Loop-mediated Isothermal Amplification. It is a novel method for isothermal nucleic acid amplification. Compared to traditional PCR, LAMP can avoid the difficulties of wide temperature fluctuations, due to the advantages of high sensitivity, specificity a