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本章内容 酶的概念与特点 酶的化学本质和组成 酶的命名和分类 酶作用的专一性 酶的作用机制 酶促反应动力学 影响酶促反应速率的因素 酶活性调节 核酶 抗体酶 同工酶 诱导酶 (自学) 酶的研究方法和酶工程 (自学) (一)酶的化学本质 酶的化学本质—蛋白质(核酸) 酶的化学本质除有催化活性的RNA、DNA之外几乎都是蛋白质。 绝大多数酶都是蛋白质。 1981年发现某些RNA分子具有催化活性,对有催化 活性的RNA称为核酶;1995年有DNA具有催化活性的报导(参见P174) 葡萄糖与己糖激酶之间的诱导契合 酶的活性中心的共同特点 酶的活性中心在酶分子整体结构中只占很小的部分; 酶的活性中心具有三维立体结构; 酶的活性中心具有特定的催化基团; 酶的活性中心具有柔性; 酶的活性中心通常是酶分子上的一个裂隙。 Km值的意义 Km 是酶的特征性常数。 K3 K2时,Km值可以用来表示酶对底物的 亲和力。 Km值愈小,酶与底物的亲和力愈大。 有机磷化合物对羟基酶的抑制作用 重金属离子等对巯基酶的抑制作用 八、酶活性的调节(自学) 1、酶活性的调节方式 2、酶的别构调控 3、可逆的共价修饰调节 4、 酶原与酶原的激活 十、酶的研究方法与酶工程(自学) 1、酶活力的测定方法 2、酶的分离纯化 3、酶工程 本章重点 概念:酶、辅酶、辅基、酶的活性中心、Km值 酶的特性、组成与结构 酶的作用机制 米氏方程及Km值的意义 酶的3种可逆性抑制作用 课外作业 P181-182思考题 :3、4、6、11 C.反竞争性抑制 加入反竞争性抑制剂,使Km和Vmax均减小 [I]增加 1/[S] 1/? 参见图6-18 三种可逆抑制的动力学比较 (4)一些重要的抑制剂 a.不可逆抑制剂 1.有机磷化合物—与酶活性直接有关的丝氨酸上的-OH牢固地结合,从而抑制某些蛋白酶或酯酶。(敌百虫、敌敌畏、农药1605等) 2.有机汞、有机砷化合物—与酶蛋白上的-SH作用,从而抑制含-SH酶的活性。 (对氯汞苯甲酸) 3.氰化物、硫化物和CO—这类物质能与酶中的金属离子形成较为稳定的络合物,使酶的活性受到抑制。 4.重金属—Ag、Cu、Hg等盐能使大多数酶失活,加入EDTA可以除去。 5.烷化剂—这一类试剂中往往含一个活泼的卤素原子,如碘乙酸、碘乙酰胺和2,4-二硝基氟苯等,使酶蛋白中的 –SH、-NH2、-OH等发生烷基化, 失活。 6.青霉素—抗菌素类药物,与糖肽转肽酶活性部位Ser-OH共价结合,使酶失活。 b. 可逆抑制剂 在可逆抑制剂中最重要的是竞争性抑制剂。 如:磺胺药、氨基叶酸等。用增加底物浓度的方法可以减弱抑制作用。 2. 温度的影响 温度对酶促反应速度的影响: a.温度升高,酶促反应速度加快(温度系数Q10:反应温度提高10? C,其反应速度与原来的反应速度之比。 Q10多为1-2 ) 。 b.温度升高,酶的高级结构将发生变化或变性,导致酶活性降低甚至丧失,反应速度很快下降。 使酶促反应速度达最大时的温度称为酶的最适温度。 3. pH对酶促反应速度的影响 pH值影响酶活力的原因 影响酶分子构象的稳定性。 影响酶分子(包括辅因子)极性基团的解离状态,使其荷电性发生变化 c. 影响底物分子的解离状态 酶反应速度最大时的溶液pH,称为酶的最适pH 4.激活剂对酶反应速度的影响 凡能提高酶活性的物质,都称为激活剂 (1)无机离子:金属离子(K+ Na+ Mg2+ Zn2+ Fe2+ Ca2+)、阴离子(Cl- Br-)、氢离子 (2)简单有机分子:某些还原剂、乙二胺四乙酸(EDTA) (3)具有蛋白质性质的大分子物质 主要是激活酶原 无活性的酶原 有活性的酶 激活作用 5.酶浓度对酶反应速度的影响 在一定条件下酶促反应的速度与酶的浓度成正比。 当底物浓度大大超过酶浓度时,反应达到最大速度。如果此时增加酶的浓度可增加反应速度,酶促反应的速度与酶的浓度成正比关系。 见P168-174 别构酶 别构酶的概念和特点 1.概念: 别构酶也称变构酶,它是代谢过程中的关键酶。通过效应物(调节物)和酶的别构中心的结合来调节其活性,从而调节酶反应速度和代谢过程。 见P168 2.别构酶的基本特点: (1)由多个亚基组成的寡聚酶 (2)具有四级结构 (3)除了有可以结合底物的酶的活性中心外,还有可以结合调节物的别构中心(有时也称调节中心)。这两个中心可能位于同一亚基上,也可能分别位于不同亚基上。 (4)每个别构酶分子可以有一个以上的活性部位和调节部位,因此可以结合 一个以上的底物分子和调
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