华东部分地区耐药结核病的分子流行病学研究-流行病与卫生统计学专业论文.docxVIP

复旦大学硕士学位论文 复旦大学硕士学位论文 中文摘要 华东部分地区耐药结核病的分子流行病学研究 中文摘要 【关键词】结核病；耐药结核病；耐药基因；基因分型；MIRU-VNTR；流 动人口：氟喹诺酮。 【中图分类号】R181 中国是仅次于印度的结核病负担大国。尽管从20世纪90年代开始，中国已 经开始实施以直接面视下的短程督导化疗方案(Directly Observed Treatment， Short Course，DOTS)为策略的现代结核病控制项目，结核病发病率仅以每年1％ 的速度缓慢下降，2007年全国仍有各种类型的肺结核病患者约258万【1】。 中国是耐药结核病高发的几个国家之一。估计2006年中国新发耐多药结核 病(Multidrug resistant TB，MDR-TB，指同时对异烟肼和利福平耐药的结核病) 13万余人，占全球总数的25％，是全球MDR-TB发病数最多的国家[2】。随着氟 喹诺酮类药物使用增加，广州的一个医院的研究发现临床上存在较高比例的氟喹 诺酮类药物耐药结核病13】。中国的结核病耐药问题尤其是氟喹诺酮耐药结核病 问题，已成为中国公共卫生事业的新的挑战【4】。 监测数据显示，华东地区同样存在较严重的结核病耐药问题，有必要开展研 究了解本地区耐药结核病的流行和传播状况以及相关的分子和社会学影响因素， 为制定进一步的结核病控制政策提供依据【5．7】。因此，本研究以华东地区的莱阳 县(山东省)、宁波市鄞州区(浙江省)和嘉定区(上海市)为研究现场，采用 现场流行病学与现代分子生物学技术相结合的方法，从群体和分子水平上对该地 区耐药结核病流行和传播进行了系统的研究。 研究的目的：描述研究地区一线抗结核药物耐药结核病和氟喹诺酮类药物氧 氟沙星耐药结核病的流行状况，分析人群的社会人口学特征、临床特征、既往治 疗史、人口流动等因素对耐药结核病流行的影响：分析基因突变与耐药表型之间 的关系；探讨研究地区耐药结核病流行的潜在原因和机制，为当地控制耐药结核 病的流行，阻断结核病的传播提供策略依据。 本研究具体研究方法和结果如下： 1．一线抗结核药物耐药结核病的流行及影响因素的研究 研究以2008年-2009年三个研究现场一年内登记的痰结核分枝杆菌培养阳 性的结核病患者为研究对象，采用现况调查的方法结合比例法药物敏感性试验， 描述当地结核病人对一线抗结核药物的耐药水平，研究共纳入306例合格的肺结 复旦大学硕士学位论文 复旦大学硕士学位论文 中文摘要 核病患者，获得302例患者的一线药物药敏结果。患者的总耐药率为16．6％，总 耐多药率为3．O％。其中，初始耐药率和初始耐多药率分别为16．7％和3．1％；获 得性耐药率和获得性耐多药率为14．3％和0％。初始耐药结核病患者占耐药结核 病患者的比例为96％。_MTB对各种药物初始耐药率的顺位从高到低依次为：链 霉素(11．8％)、异烟肼(8．0％)、利福平(4．2％)和乙胺丁醇(2．1％)。研究发现， 初始耐药在研究地区耐药结核病的流行中占主要地位。 三个研究地区的结核病总耐药率分别为：莱阳：16．5％，鄞州：24．3％嘉定t 8．8％。鄞州结核病的总耐药率高于嘉定(24．3％vs 8．8％，OR=3．32，95％ CI：I．45．7．58，P---0．004)；莱阳的结核病的耐药率也高于嘉定，差别没有统计学显 著意义(16．5％VS 8．8％，OR=2．30，95％CI：0．80．6．63，pO．05)。非本地患者的 耐药率略高于本地人口(17．3％VS 15．8％)，未发现统计学显著差异(x2=O．13， P---O．72)。另外未发现性别、年龄、既往治疗史等因素与上述对象发生结核病耐 药有关。 采用直接测序法检测伊以基因的利福平耐药决定区、katG和inhA基因的异 烟肼耐药决定区、rpsL和朋基因的链霉素耐药决定区的基因突变发现，90．9％ (10／l 1)的利福平耐药MTB菌株在rpoB基因利福平耐药决定区发生基因突变： 分别有52．2％(12／23)和21．7％(5／23)的异烟肼耐药菌株发生katG基因315 位密码子和inhA基因第l 5位密码子突变，突变菌株数占异烟肼耐药菌株数的 69．6％(一株菌株发生katG和inhA联合突变)：44．1％(15／34)的链霉素耐药菌 株的rpsL基因的43位密码子发生突变，仅l株(2．9％)MTB菌株发生朋基因 突变，合并rpsL基因43位密码子突变发生。研究结果提示rpoB、katG、inhA、 rpsL基因突变分别是当地利福平、异烟肼和链霉素耐药的主要机制。研究菌株中 采用rpoB基因突变诊断MDR．TB的灵敏度和特异度分别为100％和99．2％，具 有作为标志物诊断MDR-TB的价值。 2． 氟喹