第2节-基因工程及其应用上课(1)..ppt

1.概念：又叫做基因拼接技术 或 DNA重组技术 通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。 一 基因工程 2.原 理： 3.操作水平： 5.结 果： 基因重组 DNA分子水平 定向地改造生物的遗传性状，获得人类所需要的品种 4.操作环境： 生物体外 （一 ） 基因工程的概念 （二）基因操作的工具 1.基因的剪刀—限制性核酸内切酶（简称限制酶） 2）特点：一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子。 1）存在：主要是微生物体内 3）实例:EcoRⅠ 该限制酶只能识别GAATTC的序列，并在G和A之间将这段序列切开。 黏性末端 黏性末端 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，它们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 P P P P C T A G P 4 1 3 5 2 o P 4 1 3 5 2 0 P P A C G T 磷酸 脱氧核糖 反向平行 含氮碱基 DNA的平面结构 3，5—磷酸二酯键 　　被同一种限制酶切断的几个DNA是否具有相同的黏性末端？ 黏性末端 黏性末端 　　具有 具有相同的黏性末端的DNA分子会相互黏合起来。 C T T A A G A A T T C G 具有相同的黏性末端的DNA分子会相互黏合起来。 C T T A A G A A T T C G CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 练习使用EcoRI 剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因 黏性末端 2.基因的针线—DNA连接酶 基因操作的工具 磷酸二酯键 磷酸二酯键 黏合只能使互补的碱基连接起来 问: 黏性末端黏合的是什么部位？ 问：基因的针线--DNA连接酶连接的是什么部位? 脱氧核糖与磷酸交替链接而构成DNA骨架上的缺口（3,5－磷酸二酯键） 使用DNA连接酶制作重组DNA分子 甲片段 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT 乙片段 GGCATCTTAA AATTCCGTAG 重组DNA分子 GGCATCTTAA AATTCCGTAG 1）作用：将目的基因导入受体细胞 3.基因的运输工具——运载体 2）种类 ①质粒 ②噬菌体和某些动物病毒 分布：细菌和酵母菌 实质：拟核或细胞核以外的能够自主复制的小型环状DNA分子 二 基因工程的“四步曲” 1.提取目的基因 1 2.目的基因与运载体结合 2 3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测和鉴定 4 培育转基因抗虫棉的简要过程： 苏云金芽孢杆菌 提取 抗虫基因 与运载体DNA结合 棉花细胞(含抗虫基因) 棉花植株 普通棉花(无抗虫特性) 导入 （有抗虫特性）