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华东地区汉族人群d2s1399和d5s2500基因座的遗传多态性研究及其等位基因分型标准物的构建-病理学专业论文
华东地遂汉族入群D2S1399鞫D5S2500基瓣窿遗传多态毪臻究及其等位基鑫檬雅分型物豹拳蓥建
华东地遂汉族入群D2S1399鞫D5S2500基瓣窿遗传多态毪臻究及其等位基鑫檬雅分型物豹拳蓥建 中文摘要
华东地区汉族人群D2S1 399幂11D5S2500基因座的遗传多态
性研究及其等位基因分型标准物的构建
中文摘要
目的研究D2S1399和D5S2500基因座在中豳华东地区汉族群体的遗传多态性, 评估其在法科学中的应用价值;利用重组质粒制备这两个STR基因座的分型标准物。 方法应用PCR、聚丙烯酰胺垂直电泳及银染技术检测D2S1399和D5S2500基因 座的遗传多态性。从聚丙烯酰胺凝胶中分离出经PCR扩增后的等位基因片段,二次 扩增并纯化后的等位基因片段被分别插入至I]PUC质粒载体中。利用DNA测序证实插 入片段大小及结构的正确性后,用国际标准将插入的等位基因片段进行命名。再转染 到适滥的E coli DH50tTM细胞内选择培养,以纯化质粒为模板,扩增出各基因座的等
位基因片段后混合获得等位基因分型标准物。 结果D2S1399和D5S2500基因座在中国华东汉族群体分别检出n个和9个等
位基因,其观察杂合度分别为O.745和O.807,多态信息含量(PIC)分别为0.850和 0。750,个体识别率分别为0.958和O。917,非父排除率(PE)分别为0.554和0.643。 成功地建立了能大量生产的D2S1399及D5S2500基因座的标准等位基因片段的重组 质粒库,并制备出大量优质分型标准物。
结论D2S1399和D5S2500基因座是高度多态性的STR基因座,在法医学个人 识别和亲子鉴定中有重要应用价值。通过分子克隆制各D2S1399及D5S2500基因座的 等位基因分型标准物是一种实现D2S1399及D5S2500基因座分型标准化的可行方法。
关键词D2S1399 D5S2500遗传多态性等位基因分型标准物分子克隆
作 者:夏水秀 指导老师:冯一中
Genetic
Genetic PolymorphismsofSTRlociD2S1399andD5S2500inEasternChineseHartPopulationandtheConstructionofTheirAllelicLaddels Abstract
Genetic Polymorphisms of STR loci D2S 1 399 and D5 S2500 in Eastern
Chinese Han Population and the Construction of Their Allelic Ladders
Abstract
objective 111e aim of this study is to obtain the genetic polymorphisms data of D2S l 399 and D5S2500 STR lOCi in Eastern Chinese Hart population.and evaiuate the forensic application of the two loci.The standard allelic ladders for D2S 1 399 and D5 S2500 STR lOCi were constructed by molecular clone.
Methods Blood samples or buccal swabs of unrelated Han individuals living in eastern China were analyzed using PCR··nature polyacrylamide gel electrophoresis·-sliver
staining method.Different PCR amplified D2S 1 399 and D5S2500 lOCi allelic fragments
were isolated from the polyacrylamide gel.111e STR allelic fragments were eluted into distilled water and reamplified by PCR.11le purified allelic fragments were then blunt-end
subcloned individually into the pUC plasmid vectors.The size and structure of the inserts were confirmed bv the analysis of their
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