阴道分泌物及相关病原体检验.pptVIP

提纲 阴道分泌物检验 概述 标本采集 阴道分泌物的常规检查 病原学检验 阴道毛滴虫 真菌 细菌（革兰氏染色,加德纳菌,淋球菌梅毒螺旋体） 沙眼衣原体 支原体 病毒( HSV,CMV, HPV, HIV) 标本采集（妇产科医师进行） 24小时前禁止性交、盆浴、阴道检查、阴道灌洗及局部用药； 取材所用消毒的刮板，吸管或棉拭子必须清洁干燥，不粘有任何化学药品或润滑剂； 根据不同的检查目的可自不同部位取材。一般采用盐水浸湿的棉拭子自阴道深部或阴道穹后部、宫颈管口等处取材； 生理盐水悬滴可检查滴虫，涂制成薄片以 95% 乙醇固定，经过巴氏染色、吉姆萨染色或革兰氏染色，进行肿瘤细胞筛查或病原微生物检查。 清洁度检查 将阴道分泌物加生理盐水作涂片，用高倍镜检查，主要依靠白细胞、上皮细胞、阴道杆菌与杂菌的多少划分清洁度。 Ⅰ度 大量阴道杆菌和上皮细胞，白细胞 0-5/HPF ，杂菌无或极少。正常 Ⅱ度 中等量阴道杆菌和上皮细胞，白细胞 10-15/HPF ，杂菌少量。 亦属正常 Ⅲ度 少量阴道杆菌和上皮细胞，白细 胞 15-50/HPF ，杂菌较多。 提示有炎症 Ⅳ度 无阴道杆菌，有少量上皮细胞，白细胞 50/HPF ，大量杂菌。 多见于严重的阴道炎 正常清洁度为I-II级 临床意义: 病原菌感染，清洁度降低；如果未见病原菌，则为非特异性阴道炎 卵巢功能减退，清洁度降低 局限性： 1 分级指标不够，级别不够详细，难以实际运 用； 2 不能真正反映阴道清洁状况； 建议淘汰清洁度分级而代之以涂片染色，具体报告所见情况。 检测方法 1 直接涂片 将分泌物用生理盐水悬滴法置于低倍显微镜下观察，可见波动状或螺旋状运动的虫体将周围白细胞或上皮细胞推动。虫体大小为8-45 um，在高倍镜下观察，呈顶宽尾尖倒置梨形，大小多为白细胞的 2-3 倍，虫体顶端有前鞭毛 4 根，后端有尾鞭毛一根，体侧有波动膜，借以移动。阴道分泌物的清洁度常为Ⅲ-Ⅳ度。 注意事项 阴道毛滴虫生长繁殖的适宜温度为 25-42 摄氏度，故在检验时应注意保温，方可观察到阴道 毛滴虫 的活动。 在阴道分泌物中见到阿米巴滋养体时，提示为阿米巴性阴道炎 2 涂片染色 固定染色后呈梨形，体长8-45μm，前端有一个泡状核，核上缘有5颗排列成环状的毛基体，由此发出5根鞭毛，其中4根前鞭毛，1根后鞭毛。 3 胶乳凝集快速检查 4 培养法 检测方法： 1 湿片检查 标本置于载玻片上，加一滴2.5mmol/L KOH溶液，盖上盖玻片，置于显微镜下检查。先在低倍镜下初步检查有无菌丝和孢子，然后用高倍镜以孢子和菌丝的形态特征鉴别。 2 涂片染色 孢子呈卵圆形，比葡萄球菌大5～6倍，革兰氏染色阳性，着色不均匀。常见出芽，生成假菌丝，假菌丝长短不一。 3 培养 血琼脂或沙保氏琼脂培养基。 细菌 1 湿片检查法 取出的白带加无菌生理盐水一滴，在低、中倍显微镜下观察杆菌、球菌的比例。比较粗略，容易漏掉重要致病菌。 2 干片染色法 取出白带均匀涂抹在载玻片上，晾干后革兰氏染色（或美兰、复合染色）后，油镜下观察染色特性，细菌形态。 现在很多医院使用的妇科白带多功能染色液染色速度快，着色效果好，而且可同时观察真菌、滴虫、核异质细胞，所以逐步普及。 3 分离培养。白带的细菌分离培养价值不太大，因为病原菌多，是否致病与阴道内环境关系密切。较常做的是淋球菌培养。 4 特异生化反应。 革兰氏染色 细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，由丹麦医生汉斯·克里斯蒂安·革兰（Hans Christian Gram，1853年－1938年）于1884年所发明。 原理 通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。 革兰氏染色结果 革兰氏阳性菌体都呈紫色，阴性菌体都呈红色。