遗传变异版不hnew.ppt

橘生淮南则为橘，生于淮北则为枳。 遗传（heredity）和变异（variation）是 生命的三大基本特征之一。 §1 遗传的物质基础一. 微生物的遗传物质——核酸 原核细胞型微生物——DNA 大多CCC(covalently closed circular) dsDNA 染色体、质粒、转座因子 真核细胞型微生物——DNA 大多L(linear) dsDNA 染色体/质、转座因子 非细胞型微生物——DNA/RNA 多种形式 基因组 遗传物质的复制 原核生物：θ复制（染色体） 真核生物：多个复制起点 病毒： θ复制，σ复制 二. 质粒基本特性 大多CCC(covalently closed circular) dsDNA 自主复制 非细胞生长所必需，赋予细胞某些特性，如抗药性、致育性等 质粒可自行消失或人工去除 转移性，分接合型和非接合型 具相容性和不相容性（干扰近缘质粒） 代表性质粒 F质粒——致育性 R质粒——抗药性 Col质粒——大肠杆菌素基因 Ti质粒——对植物细胞诱癌 巨大质粒——固氮 降解性质粒——降解特殊碳源 三. 转座因子和转座 细胞基因组中能够从一个位置转移到另一个位置的一段DNA序列——转座因子 §2 基因突变变异的产生 一. 基因突变及其特性 概念 特性 1、自发性和不对应性 2、稀少性 3、诱变性 4、独立性 5、稳定可遗传性 6、可逆性 二. 基因突变分子机制 诱变机制 HNO2诱变机制 5-溴尿嘧啶（5-BU）诱变机制 移码突变 紫外线诱变机制 DNA的正常碱基对 HNO2诱变机制 ①腺嘌呤经氧化脱氨后变成烯醇式次黄嘌呤（He），He通过互变异构效应形成酮式次黄嘌呤（HK） 。 ②DNA双链第一次复制，结果Hk在6位上含有酮基，故只能与6位上含有氨基的胞嘧啶C配对。 ③DNA双链第二次复制，其中胞嘧啶（C）正常与鸟嘌呤（G）配对，使A-T → G-C ，从而实现转换。 ④当胞嘧啶被氧化成尿嘧啶（U）时，也可实现G-C → A-T 。 5-BU诱变机制5-BU（酮式）：T的类似物 移码突变 UV诱变 T-T形成 三. Ames试验 Ames试验要点 1.用途：用于检测食品、饮料、药品等是否具有诱变作用（“三致”） 2.菌株：鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型（hisˉ） 3.原理：药物作用于实验菌，如有诱变作用，则回复突变，能在基本培养基上生长，超过正常几率即为阳性 4.诱变和致癌：Ames试验阳性和致癌之间有十分明显的相关性（95％的致癌剂有诱变作用，90%非致癌剂无诱变作用） 5.优点：方法灵敏，检出率高，简便、易行，不需特殊器材，容易推广 注意 有的致癌物的诱变性是被哺乳动物肝细胞中的羟化酶系统活化的，而细菌却没有这种酶系统，故加入鼠肝匀浆的酶系统能增加检测的灵敏度。 Ames检测菌株特点 §3 基因转移与重组 转化 接合 转导 原生质体融合 一.转化(transformation) 转化的前提条件 供体菌DNA片段应为dsDNA，且大小合适：分子量在106~108时转化率高 供体菌与受体菌有一定的亲缘关系：同源性 受体菌必须处于感受态：对数生长期后期或人工诱导 二. 接合(conjugation) F－、 F＋、 Hfr、 F′菌株间的关系 F因子的四种细胞形式 根据细胞中是否存在F因子以及其存在方式的不 同，把E.coli分成四种菌株。 ①F－菌株：不含F因子，没有性菌毛，但可以通过接合作用接收F因子而变成雄性菌株（F+）； ②F＋菌株： F因子独立存在，细胞表面有性菌毛。 ③Hfr（高频重组）菌株：F因子插入到染色体DNA上，细胞表面有性菌毛。 ④F’菌株：Hfr菌株内的F因子因不正常切割而脱离染色体时，形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子，称为F′因子。细胞表面同样有性菌毛。 F++F- F质粒结构简图 三. 转导（transduction） 普遍性转导 完全转导 流产转导 局限性转导 低频转导 高频转导 普遍性转导( generalized transduction) 局限转导( restric-ted transdu-ction) 低频转导裂解物 转导和溶源转变区别 四. 原生质体融合(protoplast fusion) 基因工程主要流程 菌种保藏法 F因子存在方式及相互关系 性菌毛收缩搭桥 从otiT开始滚环复制 接合对分离 F＋×F－＝ F＋＋F＋ Hfr ×F－＝ F＋＋F- Hfr×F－杂交后的受体细胞（或接合子）大多数仍然是F－。 * 中断杂交实验及染色体图的绘制 携带F′因子的菌株称初生F′菌株。 F′×F－与F＋×F－的不同：供体的部分染色体基因随F′一起转入受体细胞。 ① 与染色体发生重组； ② 继续存在于F′因