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绿色荧光蛋白的的基因克隆及表达
PAGE
学号
08114010214
编号
2011140214
班级
生科0802
HUBEI NORMAL UNIVERSITY
分子生物学综合实验论文
论文题目
绿色荧光蛋白的基因克隆和表达
作者姓名
饶慧
指导教师
王友如
所在院系
生命科学学院
专业名称
生物科学
完成时间
2011.5.30
目 录
TOC \o 1-3 \h \z \u HYPERLINK \l _Toc297798354 引言 PAGEREF _Toc297798354 \h 1
HYPERLINK \l _Toc297798355 1 材料与方法 PAGEREF _Toc297798355 \h 4
HYPERLINK \l _Toc297798356 1.1 材料 PAGEREF _Toc297798356 \h 4
HYPERLINK \l _Toc297798357 1.1.1 实验材料 PAGEREF _Toc297798357 \h 4
HYPERLINK \l _Toc297798358 1.1.2 仪器设备 PAGEREF _Toc297798358 \h 4
HYPERLINK \l _Toc297798359 1.1.3 试剂及溶液 PAGEREF _Toc297798359 \h 5
HYPERLINK \l _Toc297798360 1.2 方法 PAGEREF _Toc297798360 \h 7
HYPERLINK \l _Toc297798361 1.2.1 重组质粒的构建 PAGEREF _Toc297798361 \h 7
HYPERLINK \l _Toc297798362 1.2.2 DH-5α 和BL-21感受态细胞的制备 PAGEREF _Toc297798362 \h 7
HYPERLINK \l _Toc297798363 1.2.3 感受态细胞的转化 PAGEREF _Toc297798363 \h 7
HYPERLINK \l _Toc297798364 1.2.4 碱法提质粒 PAGEREF _Toc297798364 \h 8
HYPERLINK \l _Toc297798365 1.2.5 酶切鉴定 PAGEREF _Toc297798365 \h 8
HYPERLINK \l _Toc297798366 1.2.6 琼脂糖凝胶电泳 PAGEREF _Toc297798366 \h 9
HYPERLINK \l _Toc297798367 1.2.7 PCR-聚合酶链式反应 PAGEREF _Toc297798367 \h 9
HYPERLINK \l _Toc297798368 1.2.8 pET-28a-GFP重组质粒转化到表达菌BL-21 PAGEREF _Toc297798368 \h 10
HYPERLINK \l _Toc297798369 1.2.9 重组绿色荧光蛋白（GFP）的诱导表达 PAGEREF _Toc297798369 \h 10
HYPERLINK \l _Toc297798370 2 结果与分析 PAGEREF _Toc297798370 \h 11
HYPERLINK \l _Toc297798371 2.1 提取质粒 PAGEREF _Toc297798371 \h 11
HYPERLINK \l _Toc297798372 2.2 重组质粒构建的鉴定 PAGEREF _Toc297798372 \h 12
HYPERLINK \l _Toc297798373 2.3 PCR检测结果 PAGEREF _Toc297798373 \h 12
HYPERLINK \l _Toc297798374 2.4 IPTG诱导表达 PAGEREF _Toc297798374 \h 13
HYPERLINK \l _Toc297798375 3 讨论 PAGEREF _Toc297798375 \h 14
HYPERLINK \l _Toc297798376 参考文献 PAGEREF _Toc297798376 \h 16
HYPERLINK \l _Toc297798377 致谢 PAGEREF _Toc297798377 \h 18
绿色荧光蛋白的基因克隆和表达研究
饶慧（指导老师：王友如）
（湖北师范学院生命科学学院 生物科学0802班 湖北 黄石 435002）
摘 要：目的：研究绿色荧光蛋白（Greed Fluorescent Protein，GFP）基因的基因克隆及在大肠杆菌中的表达。方法：通过分别将DH-5α (pEGFP
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