第六章微吧生物生长.ppt

本 章 目 录 第一节 微生物纯培养的生长 第二节 理化因素对微生物生长的影响 第三节 微生物生长的控制 微生物纯培养分离方法的比较 ３．薄膜过滤计数法 常用微孔薄膜过滤法测定空气和水中的微生物数量。 4．比浊法 为测定菌悬液中细胞数的快速方法。原理是悬液中细胞浓度与混浊度成正比，与透光度成反比，可用分光光度计测定光密度，对照标准曲线求出菌液浓度。 此法适用于菌液浓度在107个/ml以上、无杂物、颜色较浅的样品。 蛋白质总量 蛋白质总量＝含氮量×6.25 细胞总量＝蛋白质总量÷(50%～80%(或65%))≈蛋白质总量×1.54 DNA含量 核酸DNA是微生物的重要遗传物质，每个细菌的DNA含量相当恒定，平均为8.4×10-5ng. 细菌细胞的干重约为湿重的20~25%。 在工业发酵和科研中通常采取一定的措施缩短延滞期： ①通过遗传学方法改变种的遗传特性使迟缓期缩短； ②利用对数生长期的细胞作为“种子”（接种菌）； ③尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太大； ④适当扩大接种量等方式缩短迟缓期，克服不良的影响。 对数期生长特点 细胞代谢活性最强，酶活力高而稳定，组成新细胞物质最快，生长速率最大，代时最短，对环境变化敏感。 代时的计算 以二分裂的细菌为代表，假设细菌培养体在对数期to时的总菌数为No，那么到ｔ时的菌数Nt＝No×2n；式中ｎ为to到ｔ这段时间内细菌的繁殖代数。如果用G来表示世代时间(或倍增时间):即群体细胞数量增加一倍需要的时间，则：G＝(t-to)/n (1) Nt＝No×2nlgNt＝ｎlg2＋lg No ｎ＝〔lgNt－lgNo〕/ lg2 = lgNt/ N0/0.301 (2) 将(2)代入(1)式得：G＝0.301(t-t0)/lgNt/N0 (3) 通过实验可测得No、Nt和时间ｔo、ｔ，由(3)式可计算出供试微生物的世代时间G。 获得更多的菌体物质或代谢产物采取措施： 补充营养物质或取走代谢产物或改善培养条件，如对好氧菌进行通气、搅拌或振荡等 稳定期的细胞行为 细胞开始贮存糖原、异染颗粒和脂肪等贮藏物 多数芽孢杆菌在这时开始形成芽孢 有的微生物在稳定期时还开始合成抗生素等次生代谢产物 是乳酸等发酵生产的最佳收获期 恒浊器（turbidostat） 连续培养的两种方法：恒浊器和恒化器 恒浊器: 控制培养液流速，以取得菌体密度高、生长速度恒定的微生物细胞的连续培养器 可达到恒密度的目的 使微生物在最高生长速率下生长 为了获得大量菌体或与菌体生长相平行的某些代谢产物如乳酸、乙醇时，都可以利用恒浊器 恒化器（chemostat） 一种设法使培养液流速保持不变，并使微生物始终在低于其最高生长速率条件下进行生长繁殖的一种连续培养装置 通过控制某一种营养物的浓度，使其始终成为生长限制因子，控制生长速率 可获得一定生长速率的均一菌体，又可获得虽低于最高菌体产量，却能保持稳定菌体密度的菌体 恒化器 恒化器与恒浊器的比较 一、温度 生长温度的三基点 最低生长温度、最适生长温度和最高生长温度 “最适温度”，其意义是某菌分裂代时最短或生长速率最高时的培养温度 二、辐射　　 （1）紫外线(UV) 波长范围是136～397nm最强作用波段为265～266nm 作用机理: 使细胞核酸和原生质发生光化学反应，导致相邻的胸腺嘧啶(T)形成二聚体，形成嘧啶水合物和使DNA发生断裂和交联，从而 干扰核酸的复制。进而导致微生物的变异和死亡。 紫外线穿透能力很弱，多用作空气或器皿的表面灭菌及微生物育种的诱变剂。 （2）电离辐射 包括X射线、γ射线、α射线和β射线等。波长短、能量大 能使被照射的物质分子发生电离作用产生自由基，自由基能与细胞内的大分子化合物作用使之变性失活。 四、氧化还原电位 不同类型微生物生长对氧化还原电位的要求不同 好氧性微生物：+0.1伏以上时可正常生长,以 +0.3～+0.4伏为宜； 厌氧性微生物：低于+0.1伏条件下生长； 兼性厌氧微生物：+0.1伏以上时进行好氧呼吸, +0.1伏以下时进行发酵。 五、水分 （1）水的活度 用来表示环境中水对微生物生长可给性高低的指标，用aw表示。 aw值实质上是以小数来表示与溶液或含水物质平衡时的空气的相对湿度，即在相同温度和压力条件下，密闭容器中该溶液的水饱和蒸汽压（Ｐ）与纯水饱和蒸汽压（Ｐ0）的比值。 aw＝Ｐ/Ｐ0＝RH×100 （2）渗透压 低渗溶液除能破坏去壁的细胞原生质体的稳定性以外，一般不对