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人真皮三维重建及仿生人工真皮研制-外科学(烧伤)专业论文.pdf
目
目 录
缩略语表 1
英文摘要 3
中文摘要 .10
论文正文 人真皮三维重建及仿生人工真皮研制 一1 5
前 言 15
第一部分人真皮三维重建 .1 7
第一章研究背景 .17
第二章材料方法 ..19
2.1 实验材料 19
2.2获取组织切片的全景图像 .20
2.3三维重建 23
2.4真皮亚区域(subregion)纤维分布的研究 .27 2.5用micro.CT获得人脱细胞真皮(ADM)中孔隙率,孔径和孔壁厚度
.:;()
2.6统计学方法 32
第三章实验结果 .33
3.1人真皮三维重建电子模型 .33
3.2 人真皮靠近毛囊区和远离毛囊区纤维分布的差异 .33
3.3 人真皮不同深度纤维分布的差异 .34 3.4 HE、Masson’S trichrome染色和扫描电镜图片 35 3.5 Micro.CT测定人脱细胞真皮的孔隙率、孔径和孔壁厚度 36
第四章讨 论 .37
第二部分基于人真皮显微三维立体图的“Sandwich”结构的仿生人工真皮的制备,及
其对创面愈合的影响 ..38
第一章研究背景 .38
第二章材料方法 .39
2.1 实验材料和新生小鼠成纤维细胞的分离培养 .39
2.2制作不同孔径的单层胶原支架 .41
万方数据
2.3单层胶原支架孔径测量
2.3单层胶原支架孔径测量 .42
2.4支架体外生物降解检测 .43
2.5培养和接种小鼠成纤维细胞 。43
2.6细胞在支架中的分布研究 .43
2.7细胞增殖检测 44
2.8含细胞的单层胶原支架动物实验 .44
2.9含细胞的三层胶原膜(“Sandwich”and“Homogeneous”structures)的。..45 制备及动物实验 .45
2.10创面愈合检测 ..46
2.1 1 HE和Masson染色 .46
2.12 免疫组化 ..46
2.13 Western blotting ..47
第三章实验结果 .49
3.1 孔径对单层胶原膜降解、细胞粘附和增殖的影响 .49
3.2孔径对单层胶原膜创面愈合性能的影响 .50
3.3“Sandwich”结构的仿生人工真皮促进小鼠创面愈合 ..53
3.4“Sandwich”结构的仿生人工真皮促进小鼠创面细胞增殖 ..56
3.5 166.9/87.7/166.9 lxm孔径梯度的“Sandwich”人工支架显著促进了细胞增殖
.57
第四章讨 论 .58
第三部分可控性释放血管活性肠肽(VIP)的聚己内酯(PCL)纳米纤维膜的制备, 及其对体外培养细胞增殖的影响 ..60 第一章研究背景 .60
第二章实验材料和方法 .62
2.1材料和动物 62
2.2制作PCL.DA.VIP纳米纤维膜 .64
2.3 VIP释放曲线测量 .65
2.4成纤维细胞的原代培养 .65
2.5细胞体外增殖曲线 .66
2.6统计学方法 67
第三章实验结果 .68
万方数据
3.1
3.1 丙酮处理后在纳米膜上原位生成微胶囊 .68
3.2载药率(LC)和包封率(EE) .69
3.3 微胶囊的形成延长了VIP的释放时间 .70
3.4体外增殖实验证明VIP的可控性释放显著提高细胞增殖率 .70
第四章讨 论 .73
全文结论 .74
参考文献 .75
文献综述一Three-dimensional reconstruction of light microscopy image sections: present and future................................................ ................................ 8 1
参考文献 109
文献综述二组织工程皮肤和难愈合性创面治疗 1 17
参考文献 128
以第一作者发表的文章、专利 132
致 谢 ..1 33
万方数据
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