利用iTRAQ技术联合2DLC-MS研究不同加工工艺鹿茸的-药学学报.PDF

药学学报 Acta Pharmaceutica Sinica 20 15, 50 ( 12): 1637 1644 ·1637 · 利用iTRAQ 技术联合2D LC-MS 研究不同加工工艺鹿茸的 差异蛋白质组学 1, 2 1* 3 1 1 1 1 靳梦亚 , 董 玲 , 罗元明 , 隗 丽 , 莫 美 , 侯成波 , 李志远 (1. 北京中医药大学, 北京 100 102; 2. 北京中医 大学东方医院, 北京 100078; 3. 中国科学院微生物研究所, 北京 10010 1) 摘要: 利用iTRAQ 同位素标记法结合2D LC-MS/MS 法对不同加工工艺鹿茸 (鲜品、煮炸、直接冻干、匀 浆、冻干加保护剂、冻干未加保护剂、冻干加保护剂40 , 10 天) 进行比较蛋白质组研究。经质谱共分析共得 到蛋白质1 0 15 种。利用Protein Pilot 软件 (Version 4.5) 进行比较分析, 差异蛋白 ( 阈值在 1.50 或 0.60 范围, P ≤0.05) 蛋白为87 种。变化最大的是煮炸鹿茸组, 其差异蛋白质 (P ≤0.05) 相对于鹿茸鲜品, 上调蛋白质有24 种, 下调蛋白质有33 种。7 种差异极显 (P ≤0.001) 下调蛋白多具有参与钙离子结合及ATP 结合等功能。其他 组差异蛋白质种类没有明显变化, 与通过层次聚类分析的结果相同。冻干加保护剂 (海藻糖) 工艺可提高差异极 显 蛋白质包括II 型、XII 型胶原蛋白质 (P ≤0.00 1) 的相对含量, 并且使得功能显 蛋白质与鲜品鹿茸比较, 含 量相对增加。这些蛋白具有活化血小板、维护精原细胞、使肿瘤细胞表达失调等生理功能。通过对差异蛋白质 的层次聚类 (hierarchical clustering) 及GO (gene ontology) 注释分析, 表明不同加工工艺鹿茸与鲜品鹿茸的差异 蛋白质在分子功能、生物过程及细胞成分中, 具有广泛的生物学功能覆盖范围, 其中分子功能主要体现在结合功 能 (52.7%) 、催化活性功能 (25.3%) 、结构分子活性及转运功能 (6.6%)。 关键词: 相对和绝对定量同位素标记; 鹿茸; 差异蛋白质组学; 2DLC-MS; 生物学信息 中图分类号: R9 17 文献标识码: A 文章编号: 0513-4870 (20 15) 12- 1637-08 Comparative proteomics study of different processing technology for pilose antler using iTRAQ technology coupled with 2D LC-MS 1, 2 1* 3 1 1 1 1 JIN Meng-ya , DONG Ling , LUO Yuan-ming , YU Li , MO Mei , HOU