感受态细末胞制作和转化效率的研究.docVIP

感受态细末胞制作和转化效率的研究.doc

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感受态细末胞制作和转化效率的研究

PAGE 天津农学院 毕 业 论 文 中文题目:感受态细胞制作和转化效率的研究 英文题目:Establishment of Competent Cells and Analysis of Transformation Efficiency 学生姓名 于晓猛 系 别 动物科学系 专业班级 2010 级 动物医学 专升本 班 指导教师 李吉霞 成绩评定 2012年6月 目 录 TOC \o 1-3 \h \z \u HYPERLINK \l _Toc326519975 1 前言 PAGEREF _Toc326519975 \h 1 HYPERLINK \l _Toc326519976 2 材料与方法 PAGEREF _Toc326519976 \h 2 HYPERLINK \l _Toc326519977 2.1 材料与仪器 PAGEREF _Toc326519977 \h 2 HYPERLINK \l _Toc326519978 2.1.1 菌种及质粒 PAGEREF _Toc326519978 \h 2 HYPERLINK \l _Toc326519979 2.1.2 培养基 PAGEREF _Toc326519979 \h 2 HYPERLINK \l _Toc326519980 2.1.3 仪器设备 PAGEREF _Toc326519980 \h 2 HYPERLINK \l _Toc326519981 2.2方法 PAGEREF _Toc326519981 \h 2 HYPERLINK \l _Toc326519982 2.2.1制备感受态细菌 PAGEREF _Toc326519982 \h 2 HYPERLINK \l _Toc326519983 2.2.2 DNA重组子的转化感受态大肠杆菌 PAGEREF _Toc326519983 \h 3 HYPERLINK \l _Toc326519984 2.2.3质粒DNA提取 PAGEREF _Toc326519984 \h 5 HYPERLINK \l _Toc326519985 3结果 PAGEREF _Toc326519985 \h 8 HYPERLINK \l _Toc326519986 3.1 感受态细菌转化效率观察 PAGEREF _Toc326519986 \h 8 HYPERLINK \l _Toc326519987 3.2 质粒提取结果观察 PAGEREF _Toc326519987 \h 10 HYPERLINK \l _Toc326519988 4 讨论 PAGEREF _Toc326519988 \h 11 HYPERLINK \l _Toc326519989 4.1 DNA 重组受体系统 PAGEREF _Toc326519989 \h 11 HYPERLINK \l _Toc326519990 4.2感受态细胞的制备 PAGEREF _Toc326519990 \h 11 HYPERLINK \l _Toc326519991 4.3 质粒转化效率 PAGEREF _Toc326519991 \h 12 HYPERLINK \l _Toc326519992 参考文献 PAGEREF _Toc326519992 \h 13 HYPERLINK \l _Toc326519993 致 谢 PAGEREF _Toc326519993 \h 14 HYPERLINK \l _Toc326519994 附录1:外文文献原文 PAGEREF _Toc326519994 \h 15 HYPERLINK \l _Toc326519995 附录2:外文文献原文译文 PAGEREF _Toc326519995 \h 20 摘 要 质粒转化进入大肠杆菌感受态细胞是分子克隆的关键步骤,是基因克隆以及DNA文库构建等研究中频繁使用的一项重要的常规操作。本研究通过复苏和扩增DH5α细菌,每50ml菌液用10ml预冷的0.1mol/L的CaCl2重悬,冰浴30min。于4℃,离心回收。每50ml初始培养物用2ml用冰浴的0.1mol/L的CaCl2重悬,100ul/份,-4℃放置24

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